SARS冠状病毒PUP5蛋白的表达、纯化及鉴定

• 作 者: 王红霞 孟庆文 刘永刚 施建忠 孔宪刚 冉多良 吴东来
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,新疆农业大学动物医学院
• 出 处: 中国预防兽医学报
• 发表日期: 2006年4期
• 关键词: SARS冠状病毒 PUP5蛋白 表达 SARS-CoV PUP5 protein expression

经RT-PCR扩增了SARS冠状病毒（SARS-CoV）BJ01株的PU5基因（putative uncharacterized gene5）的cDNA，将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中，命名为pGEX-PU5，测序正确后将阳性质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）中，IPTG诱导表达，表达的融合蛋白命名为pGEX-PuP5，并用Glutathione Swpharose^TM 413亲和层析柱对表达产物进行纯化，然后用PreScission^TM Protease酶对融合蛋白进行解离，获得PUP