人胸腺素α原cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作 者: 张符光 张兆山
• 机 构: 军事医学科学院卫生学环境医学研究所,中国人民解放军总后勤部分子遗传学实验室
• 出 处: 生物化学杂志
• 发表日期: 1996年4期
• 关键词: 人胸腺素α原 原核表达 CDNA 制备 Human prothymosin α Procaryotic expression E-rosette-formati
• 基金项目: 总后勤部分子遗传学实验室基金

采用基因工程方法制取人胸腺素α原获得成功。用２０μｇ／ｍｌ植物血球凝集素（ＰＨＡ）和５００Ｕ／ｍｌ重组人白细胞介素２（ＩＬ－２）联合刺激人胎儿胸腺细胞，从中提取总ＲＮＳ，经反转录ＰＣＲ获得了人胸腺素α原ｃＤＮＡ；将之克隆入ｐＵＣ１９中，序列测定表明与已报道序列一致，进一步将之亚克隆入原核表达载体ｐＢＶ２２０，转化大肠杆菌ＤＨ５α，观察到在不改变氨基酸编码的前提下，增加胸腺素α原上游引物中Ａ、Ｔ含量