探讨DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)表达与SEPT9基因甲基化的关系，以及二者在结直肠癌诊治中的应用前景。
方法收集75例结直肠癌及癌旁组织、68例结直肠高级别内瘤变组织(简称癌前病变组织)和高级别内瘤变旁组织(简称癌前病变旁组织)，采用焦磷酸测序检测SETP9基因甲基化水平，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测SEPT9 mRNA的表达，采用免疫组化方法检测SETP9和DNMT3b的蛋白表达。采用脂质体介导法，将DNMT3b siRNA和阴性对照siRNA转染HT-29细胞，设DNMT3b siRNA 15 nmol/L组、DNMT3b siRNA 30 nmol/L组、阴性对照siRNA 15 nmol/L组、阴性对照siRNA 30 nmol/L组和空白对照组。采用焦磷酸测序检测各组SEPT9基因甲基化和DNMT3b mRNA表达水平。
结果结直肠癌组织、癌旁组织、癌前病变组织和癌前病变旁组织中，SEPT9基因甲基化率分别为(76.8±6.5)%、(14.4±2.6)%、(34.6±5.0)%和(7.4±1.2)%，结直肠癌组织最高(P<0.001)；SEPT9mRNA的相对表达量分别为0.18±0.03、0.89±0.41、0.69±0.41和1.01±0.21，结直肠癌组织最低(P<0.001)，而癌旁组织、癌前病变组织及癌前病变旁组织差异无统计学意义(P>0.05)；SEPT9蛋白表达阳性率分别为12.0%(9/75)、53.3%(40/75)、55.1%(38/69)和62.3%(43/69)，结直肠癌组最低(P<0.001)，而癌旁组、癌前病变组及癌前病变旁组差异无统计学意义(P>0.016 7)；DNMT3b蛋白表达阳性率分别为56.3%(45/75)、26.7%(20/75)、46.4%(32/69)和33.3%(23/69)，结直肠癌组最高(P<0.001)，但与癌前病变组差异无统计学意义(P>0.016 7)。体外实验显示，空白对照组、阴性对照siRNA 15 nmol/L组、阴性对照siRNA 30 nmol/L组、DNMT3b siRNA 15 nmol/L组和DNMT3b siRNA 30 nmol/L组中，DNMT3b siRNA 30 nmol/L组DNMT3b mRNA表达量最低，与其他各组差异均有统计学意义(均P<0.05)，SEPT9基因甲基化率最低，但与DNMT3b siRNA 15 nmol/L组差异无统计学意义(P>0.05)。
结论在结直肠癌病变进程的不同阶段，DNMT3b的表达与SEPT9基因甲基化水平有明显的相关性，DNMT3b高表达可能是SEPT9基因甲基化前重要的分子事件，在结直肠癌早期病变诊治中具有重要的潜在应用价值。