端粒酶逆转录酶启动子热点突变的ARMS-LNA-qPCR检测方法建立

• 作 者: 张洁 李方 齐长海 梁国威
• 机 构: 北京大学航天临床医学院检验科,航天中心医院病理科
• 出 处: 中国实验诊断学
• 发表日期: 2020年4期
• 关键词: 端粒酶逆转录酶 -124bp(C/T) -146bp(C/T) 荧光定量PCR 肝细胞肝癌 Telomerase reverse transcriptase-1

目的建立一种定量检测端粒酶逆转录酶(TERT)启动子区-124bp(C/T)和-146bp(C/T)位点突变率的实时荧光定量PCR方法。方法以常规PCR扩增含有TERT热点突变位点的纯化产物作为检测标本,采用等位基因扩增阻滞原理(ARMS)的引物,并结合锁核酸(LNA)探针作为野生等位基因抑制子,建立实时荧光定量PCR的TERT启动子热点突变率检测方法(ARMS-LNA-qPCR)。在30例表观健康人确定检测下限。结果所建方法的突变率标准曲线为:-124bp(C/T)突变率%=10(0.262×