【摘 要】
：
目的 以特异引物双扩增即时PCR技术K-ras检测试剂盒(下称ADx-K-ras即时PCR试剂盒)和Sanger DNA测序法同时检测结直肠癌和肺癌患者K-ras基因,以了解K-ras基因突变频率和突变类
【机 构】
：
厦门大学附属第一医院病理科,福建省肿瘤医院肿瘤研究所,解放军第一七四医院病理科,厦门大学生物医学研究院
论文部分内容阅读
目的 以特异引物双扩增即时PCR技术K-ras检测试剂盒(下称ADx-K-ras即时PCR试剂盒)和Sanger DNA测序法同时检测结直肠癌和肺癌患者K-ras基因,以了解K-ras基因突变频率和突变类型,比较ADx-K-ras即时PCR试剂盒和Sanger DNA测序法用于肿瘤K-ras基因体细胞突变检测的临床价值.方法 收集临床肿瘤病理石蜡切片样品827例,其中肠癌样品583例,肺癌样品244例,提取DNA后,对K-ras基因第12和13密码子进行PCR扩增后,使用ADx-K-ras即时PCR试剂盒进行检测,与此同时,将PCR扩增后的产物进行Sanger DNA测序.两种方法对K-ras基因第12和13密码子的检测结果进一步进行各个突变类型的数目和突变率的统计对比.结果 ADx-K-ras即时PCR试剂盒对827例样品检测都得到了明确的结果,检测成功率为100%,Sanger DNA测序成功检测了677例,成功率为81.9%.583例肠癌样品中ADx-K-ras即时PCR试剂盒检测出突变192例,突变检出率为32.9%,Sanger DNA测序成功的样品533例,检出突变160例,突变检出率为30.0%.244例肺癌样品中ADx-K-ras即时PCR试剂盒检出突变26例,突变检出率为10.7%,Sanger DNA测序成功的样品144例,检出突变12例,突变检出率为8.3%.肠癌中第12密码子第2位的GGT→GAT最常见,占全部突变的35.1%(66/188),其次是第13密码子第2位的GGC→GAC,26.6%(50/188),第12密码子第2位的GGT→GTT,18.6%(35/188),第12密码子第1位的GGT→GCT最少见,1.6%(3/188).肺癌中第12密码子第1位的GGT→GTT最常见,占全部突变的40.9%(9/22),同样第12密码子第1位的GGT→GCT最少见,占全部突变的4.5%(1/22).结论 肠癌中K-ras突变率明显高于肺癌.对于甲醛固定石蜡包埋样品而言,ADx-K-ras即时PCR试剂盒对样品的DNA质量的耐受性较好,检测成功率高于Sanger DNA测序,可替代Sanger DNA测序法成为临床上对肿瘤K-ras基因体细胞突变检测的实用方法.
其他文献
为了深入研究斯氏艾美耳球虫的致病性,通过给幼兔人工感染不同数量的斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊,对其发病后的急性临床症状及病理变化进行观察与分析.将幼兔分为4组,空白对照
目的探讨重组日本血吸虫四跨膜蛋白第二亲水基团融合蛋白(GST-TSP2HD)抗血吸虫感染免疫保护效果。方法采用Glutathione sepharose 4B胶亲和层析法大量制备GST-TSP2HD蛋白。实
利用澜沧江流域云南境内8个气象站1950s-2007年的逐月气象数据,现状作物种植、农业耕作、田间水分管理等资料,应用Mann-Kendall法和R/S分析法,探索50多年来流域区的干湿变化、农业灌溉定额转折变化趋势及分布规律。结果表明:年、季平均温度普遍地显著升高,降水量干季增加、湿季减少;大部分地区的参照作物腾发量ET0在年度及干、湿季都呈增加趋势,仅在流域中段大理、剑川、耿马的部分时段为减少
[目的]研究SPRN基因在不同组织中的表达水平和机制.[方法]选择3种不同品系的小鼠为试验材料,利用半定量RT-PCR方法,测定不同品系小鼠各组织中SPRN基因的mRNA表达水平,并对其
针对青果(Fructus Canarii)所含的化学物质、现代药理作用、临床应用以及相关的食用研究进行整理分析,为青果的进一步开发与研究提供参考.
以C_4作物高粱为材料,研究了盐胁迫下新生叶片结构和光合特性的系统调控.结果表明:(1)盐胁迫导致成熟叶和新生叶水势、光合速率、气孔一导度明显下降,光抑制程度略有增强;并
[目的]探讨8年生卷荚相思人工林的生长规律、生物量和生产力。[方法]于2000年在广西南宁地区用卷荚相思实生苗造林,2008年设置3块标准地进行调查,分析卷荚相思的生长过程和生
通过对西安市第三污水处理厂实际进水量的调查研究分析,得到了污水处理厂实际进水量变化系数;实际监测了污水处理厂粗格栅、细格栅的截留栅渣量以及曝气沉砂池的浮油脂和沉砂
[目的]探讨干苹果渣补饲料对奶牛产奶性能的影响.[方法]选择胎次、泌乳阶段、日产奶量相近的荷斯坦泌乳奶牛48头,随机分为6组.由苹果渣、苜蓿草粉、玉米和预混料组成奶牛补饲
探讨油菜包衣种子的贮存性能,为油菜种衣剂的研制、油菜种子的贮存提供理论依据。用薄膜型种衣剂和丸化型种衣剂包衣处理杂交和常规油菜种子,检测贮存期间包衣种子的发芽势、