【摘 要】
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目的 研究胃癌组织中野生型和突变型dna聚合酶β在dna修复过程中的作用,为进一步探讨肿瘤的病因发病学奠定基础.方法 采用聚合酶链反应(pcr)和分子克隆技术,以野生型和突变型
【机 构】
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河南省肿瘤医院病理科,郑州大学基础医学院病理生理学教研室,郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室
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目的 研究胃癌组织中野生型和突变型dna聚合酶β在dna修复过程中的作用,为进一步探讨肿瘤的病因发病学奠定基础.方法 采用聚合酶链反应(pcr)和分子克隆技术,以野生型和突变型dna聚合酶β基因为模板,扩增后构建pgem-t-polβ克隆载体,经pcr筛选,亚克隆于pet28a(+)表达载体中,并转化至大肠杆菌bl21(de3)感受态细菌,经诱导剂异丙基-β-d-硫代半乳糖苷( iptg)诱导表达后,通过镍柱亲和层析法纯化蛋白.设计3条单链dna引物,退火合成含有单碱基缺失的dna底物,与纯化蛋白共做碱基
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