新型鸭呼肠孤病毒σB蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

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为制备新型鸭呼肠孤病毒(new-type duck reovirus,NDRV)XX 株σB 蛋白的多克隆抗体,试验经 RT-PCR扩增 NDRV XX 株σB 基因编码序列,构建原核表达质粒 pET-32a(+)-σB,将其转化至大肠杆菌 BL21(DE3)感受态细胞后,经 IPTG 诱导获得 His-σB 重组蛋白。SDS-PAGE 显示成功表达出约55 ku 的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,其表达时的最佳诱导时间、IPTG 诱导浓度分别为3 h 和0.25 mmol/L。经 Ni2+柱亲和层析纯化
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