凝胶过滤层析纯化白喉类毒素工艺的优化

• 作 者: 何岩 张明华 邓海清 段霄 李硕航 杨朝晖 刘建凯 郑海发
• 机 构: 102600 北京民海生物科技有限公司研发中心,102600 北京民海生物科技有限公司研发中心,102600 北京民海生物科技有限公司研发中心,102600 北京民海生物科技有限公司研发中心,1026
• 出 处: 国际生物制品学杂志
• 发表日期: 2018年41期
• 关键词: 白喉类毒素 色谱法 凝胶 研究设计

目的

通过定制设计优化白喉类毒素(diphtheria toxoid，DT)层析纯化工艺。

方法

将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose 4FF(4FF)和Sephacryl S-300(S-300)凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计，将上样体积、样品浓度、洗脱流速、层析介质设为实验因子，将层析载量、纯度、收率设为响应值，建立数学模型，确定凝胶过滤层析的最优层析参数，并对实验结果进行工艺验证。

结果

定制设计的实验结果显示，S-300凝胶过滤层析纯化的DT纯度和收率均高于4FF凝胶过滤层析。进一步分析确定，S-300凝胶过滤层析的最佳参数为：上样体积2.5%，样品浓度45 mg/ml，洗脱流速45 cm/h。当以最佳参数进行S-300凝胶过滤层析纯化时，层析工艺的验证结果符合预期。

结论

S-300比4FF更适宜作为DT纯化工艺的凝胶层析介质。