探讨miR-21、miR-19a在幼年特发性关节炎(JIA)发病中的作用及与JAK/STAT通路关键靶基因(SOCS3、STAT3)的相互关系。
方法收集广州市妇女儿童医疗中心确诊的33例活动期JIA患儿(病例组，其中全身型组20例，关节型组13例）；健康对照组20名。Ficoll法分离PBMCs，提取和纯化miRNA，反转录为cDNA;通过Targetscan和RNA22共同预测靶基因，设计引物，miR-21、miR-19a以U6为内参，STAT3、SOCS3、IL-6、TNF-α mRNA以β肌动蛋白为内参，应用荧光定量PCR分别检测其组间表达，计算标准化后的2-ΔΔCT值表示miRNA的相对表达含量，非参数检验统计2组数据2-ΔΔCT的差异。
结果病例组与对照组miR-21表达水平低于对照组，差异有统计学意义(Z=2.11，P=0.036)；其中，对照组miR-21相对表达量为全身型组的7.7(7~8.5)倍、关节型的6.49(6~7)倍，差异有统计学意义(Z=2.615，P=0.014 9; Z=2.654，P=0.029 1);全身型组与关节型组间miR-21表达水平差异无统计学意义(Z=0.221，P=0.827 1)。病例组与对照组miR-19a表达水平低于对照组，差异有统计学意义(Z=2.41，P=0.014);其中，对照组miR-19a相对表达量为全身型组的11.3( 10～12.1)倍、关节型的12.2(12~13.5 )倍，差异有统计学意义(Z=2.334，P=0.0157;Z=2.414，P=0.0266);全身型组与关节型组间miR-19a表达水平差异无统计学意义（Z=0.538，P=0.596)。软件预测显示与JAK/STAT通路相关的STAT3，SOCS3、TNF-α分别为miR-21、miR-19a的靶基因。荧光定量PCR示病例组（全身型组、关节型组)STAT3 [6.24 (2.81，7.54)与3.97 (1.81，5.75)，P=0.001，0.008]、TNF-α[ 3.03( 2.07，3.80)与3.42( 2.46，4.68)，P=0.002，0.001 ]、IL-6[4.75(3.59，6.32)与3.52 (2.31，7.51)，P =0.006，0.036]、SOCS3 [2.54 (1.77，4.00)与3.57 (1.95，3.83)，P =0.003，0.001 ] mRNA相对表达量较对照组高;病例组(全身型组、关节型组）STAT3 mRNA相对表达量与miR-21呈负相关(r=-0.585 4，P=0.006 7;r=-0.613 4，P=0.044 7 )，病例组(全身型组、关节型组）TNF-α，SOCS3 mRNA相对表达量与miR-19a呈现负相关，全身型组TNF-α(r=-0.664 2，P=0.001 4)、SOCS3(r=-0.790 3，P=0.000 1 )。关节型组TNF-α (r=-0.626 1，P=0.039 3)、SOCS3 (r=-0.882 4，P=0.003 )。
结论JIA患者与健康人相比，PBMCs中miR-21、miR-19a表达水平的降低，其靶基因STAT3、SOCS3、TNF-α mRNA表达升高，提示JAK/STAT通路激活,miR-21、miR-19a水平降低与该通路的激活有关。