【摘 要】
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目的 探讨二甲双胍对丙泊酚麻醉引起的新生乳鼠海马神经元突触损伤及凋亡相关蛋白表达的影响.方法 将60只7日龄雄性SD乳鼠按照随机数字表法分为3组:对照组(正常乳鼠为空白对照),丙泊酚麻醉组(腹膜注射丙泊酚诱导麻醉模型)和二甲双胍治疗组(在麻醉前30 min进行二甲双胍注射预处理),每组20只.通过Morris水迷宫试验检测乳鼠的记忆功能.通过蛋白质印迹法分析海马神经元凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Bad的蛋白表达.通过TUNEL荧光检测海马神经元细胞凋亡.通过免疫组织化学染色分析海马区裂解的caspas
【机 构】
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陕西省人民医院 麻醉科 陕西 西安 710068;陕西省人民医院 神经内科 陕西 西安 710068;陕西省人民医院 儿科 陕西 西安 710068
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目的 探讨二甲双胍对丙泊酚麻醉引起的新生乳鼠海马神经元突触损伤及凋亡相关蛋白表达的影响.方法 将60只7日龄雄性SD乳鼠按照随机数字表法分为3组:对照组(正常乳鼠为空白对照),丙泊酚麻醉组(腹膜注射丙泊酚诱导麻醉模型)和二甲双胍治疗组(在麻醉前30 min进行二甲双胍注射预处理),每组20只.通过Morris水迷宫试验检测乳鼠的记忆功能.通过蛋白质印迹法分析海马神经元凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Bad的蛋白表达.通过TUNEL荧光检测海马神经元细胞凋亡.通过免疫组织化学染色分析海马区裂解的caspase-3阳性细胞面积.通过免疫组化检测海马CA1区突触后密度蛋白95(PSD95)蛋白阳性表达.通过蛋白质印迹法分析PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的蛋白表达.结果 第1天各实验组乳鼠到达平台的潜伏期比较差异无统计学意义(P>0.05),到第3天和第5天,丙泊酚麻醉组较对照组乳鼠到达平台的潜伏期时间增多,差异有统计学意义(P<0.05),二甲双胍治疗组较丙泊酚麻醉潜伏期时间缩短,差异有统计学意义(P<0.05).丙泊酚麻醉组较对照组Bax和Bad的蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);二甲双胍治疗组较丙泊酚麻醉组Bax和Bad的蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05).丙泊酚麻醉组较对照组TUNEL阳性细胞数量增多,差异有统计学意义(P<0.05);二甲双胍治疗组较丙泊酚麻醉组TUNEL阳性细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05).丙泊酚麻醉组较对照组乳鼠海马CA1区域、CA3区域和DG区域的caspase-3阳性细胞面积增多,差异有统计学意义(P<0.05);二甲双胍治疗组较丙泊酚麻醉组caspase-3阳性细胞面积减少,差异有统计学意义(P<0.05).丙泊酚麻醉组较对照组的PSD95阳性表达显著降低,二甲双胍治疗组较丙泊酚麻醉组PSD95阳性表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).丙泊酚麻醉组较对照组p-PI3k/PI3K、p-GSK-3β/GSK-3β和p-Akt/Akt蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);二甲双胍治疗组较丙泊酚麻醉组p-PI3k/PI3K、p-GSK-3β/GSK-3β和p-Akt/Akt蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 二甲双胍通过激活PI3K/Akt/GSK-3β信号通路抑制丙泊酚诱导的海马神经元突触损伤及凋亡蛋白表达,改善乳鼠的幼年空间学习和记忆能力.
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