rAAV 2-GPⅡb／GPⅢa载体构建和体外表达、功能实验

• 作 者: 王凯 彭建强 陈方平 吴小兵
• 机 构: 中南大学湘雅医院血液科,国家863病毒载体研究发基展地基
• 出 处: 中国实验血液学杂志
• 发表日期: 2006年2期
• 关键词: 腺相关病毒载体 血小板无力症 血小板膜糖蛋白GPⅡb/GPⅢa rAAV2 vector Glanzmann＇s thrombasthenia GPⅡb/

为了研究rAAV载体介导的血小板无力症基因治疗的可行性，构建了由CMV启动子调控的rAAV2-Ⅱb、rAAV2-Ⅲa病毒载体，并采用多种方法验证了rAAV2-Ⅱb和rAAV2-Ⅲa病毒载体在真核细胞中的表达能力，其中包括用RT-RCR方法检测BHK-21细胞感染24小时（MOI=1×10^5v.g／cell）后目的基因在mRNA水平的表达，用流式细胞术的方法检测不同MOI和目的基因表达之间的量效关系，采用Western blot的方法检测BHK-21细胞感染48小时后（MOI：1×10