【摘 要】
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目的 观察DDX46基因沉默后食管鳞癌Eca-109细胞裸鼠皮下移植瘤的生长变化,在活体动物模型中进一步研究DDX46在食管鳞癌发生发展中的作用.方法 4周龄健康雌性BALB/c裸鼠25只随
【机 构】
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兰州大学第二医院胸外科兰州大学第二临床医学院 兰州730030
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目的 观察DDX46基因沉默后食管鳞癌Eca-109细胞裸鼠皮下移植瘤的生长变化,在活体动物模型中进一步研究DDX46在食管鳞癌发生发展中的作用.方法 4周龄健康雌性BALB/c裸鼠25只随机分为3组.应用RNA干扰技术通过慢病毒载体构建获得DDX46基因沉默的慢病毒颗粒(实验组:DDX46-shRNA-LV,n=10)及空载体慢病毒颗粒(对照组:Control-LV,n=10),分别感染食管鳞癌Eca-109细胞株,每只4× 106个细胞量注射至BALB/c裸鼠右腋皮下;以人永生化食管鳞状上皮细胞Het-1A为空白对照组(n=5),每侧4×106个细胞量分别注射至BALB/c裸鼠双侧腋皮下.检测各组移植瘤生长情况,活体成像仪观察各组荧光表达量.Westernblotting检测DDX46基因沉默后移植瘤组织凋亡信号通路关键分子表达的变化.结果 与对照组相比,沉默DDX46基因使裸鼠移植瘤体积减小、重量减轻,生长减缓(P＜0.001);小动物活体成像显示DDX46-shRNA-LV组荧光区总荧光表达量和平均荧光表达量均明显低于Control-LV组(P＜0.001);Het-1A细胞接种裸鼠不成瘤.Western blotting检测显示,与对照组比较,沉默DDX46基因使移植瘤DDX46蛋白表达水平显著下降(P＜0.01),而cleaved Caspase-3和cleaved PARP-1蛋白表达水平显著上升(P＜0.01).结论 沉默DDX46基因可显著抑制裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是通过激活细胞凋亡信号通路而发挥抑瘤作用.
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