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目的探讨封闭温度、时间、ＢＳＡ浓度、Ｔｗｅｎ２０浓度及混合标本个数５因素各２水平对混合血清法检测抗－ＨＣＶ的影响。方法应用正交设计的方法进行实验分组，采用ＥＩＡ法检测抗－ＨＣＶ。结果封闭条件为０．５％ＢＳＡ，３７℃，３０ｍｉｎ；洗涤液为０．１５％Ｔｗｅｅｎ２０，混合标本个数为５。采用正交设计的实验方法可减少７５％的实验次数。结论在进行多因素的实验研究时，正交设计是一种高效的设计方法。