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摘 要 目的：评价肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌的直接涂片显微镜检和培养检查的临床效果。方法：采用直接厚涂片萋-尼法抗酸染色显微镜检和BACTEC-TB960快速培养系统，对670例肺结核患者痰标本进行检测。结果：快速培养法检测的阳性率为36.6%，直接涂片镜检的阳性率为24.6%，两种检测法的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)；两种方法联合检测的阳性率为41.0%，高于培养法阳性率(P<0.05)。痰标本的留取时间对培养法检出率有很大影响，晨痰检出率高于即时痰(P<0.01)。结论：采用直接涂片镜检与培养法联合检测，是提高肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌检出率的有效方法，同时还应重视痰标本留取时间对检出率的影响。
关键词 结核 肺 分枝杆菌 痰 培养
肺结核作为我国单因素致死数最高的传染性疾病，由于耐药结核杆菌出现、人口众多且流动性大等因素，目前的疫情呈上升趋势[1，2]。世界卫生组织宣布“全球处于结核病紧急状态”，为进一步推动全球预防与控制结核病的宣传活动，于1995年底决定把每年的3月24日定为“世界防治结核病日”，并于1997年宣布了一项被称为“直接观察短期疗程”的行动计划，其目标是治愈95%的肺结核患者。肺结核的早期发现主要靠实验室诊断。我们对670例肺结核患者痰标本进行BACTEC-TB960快速培养系统与直接涂片镜检相结合检测，以进一步提高结核分枝杆菌的检出率。
材料与方法
标本来源：肺结核患者670例痰标本均来自长春市传染(结核)病医院2005年3月～2008年1月的住院患者。其中男399例，女271例，年龄8～86岁。
方法：①痰标本直接涂片采用Ziehl-Neelsen染色法(国际防痨协会及中国防痨协会推荐方法)，镜检结果采用结核病细菌学检验规程的有关标准报告。抗酸染色试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供。②BACTEC-TB960快速培养仪及所需试剂为美国BD公司产品，参照仪器操作手册进行检测。
统计学方法：采用SPSS10.0统计软件包进行统计处理，选X2检验。
结 果
痰涂片镜检与培养：670例肺结核患者痰涂片抗酸染色镜检，阳性165例，阳性率24.6%，BACTEC-TB960快速培养检查结核分枝杆菌阳性245例，阳性率36.6%。培养法检查的阳性率高于直接涂片镜检(P<0.01)，见表1。
痰涂片镜检与培养法联合检测：肺结核患者痰标本直接涂片镜检与培养法联合检测结核分枝杆菌，阳性率为41.0%(阳性275例，阴性395例)，与培养法检查阳性率36.6%(阳性245例，阴性425例)差异有统计学意义(P<0.05)。
即时痰与晨痰的培养检查结果：对309例肺结核患者的即时痰与晨痰进行了培养对照检查。结果：即时痰培养阳性101例，阳性率为32.7%，晨痰培养阳性144例，阳性率46.6%。晨痰培养的检出率明显高于即时痰(P<0.01)。
讨 论
痰涂片抗酸染色查找结核分枝杆菌作为细菌学检测的常规手段之一，简便、经济、快捷是其优点，但检出率低[3]而且标本的选取、涂片的质量以及显微镜检速度等人为因素都会较大地影响痰检质量，但作为现代防痨策略的重要组成部分，仍将作为检查结核杆菌的首选方法[4]。由于阳性涂片时痰液中菌量必须>1×104ml，其阳性率与患者排菌量明显相关。故为提高阳性率，我们采用了厚涂片法，结果对痰涂片抗酸染色镜检的阳性率为24.6%，与国内外文献报道一致[5，6]。
结核分枝杆菌培养在结核病细菌学诊断方面具有决定性意义，可以提高阳性率[7]。近年来，BACTEC-TB960作为一种标准化的培养系统，能促进分枝杆菌生长，并对其他细菌生长有抑制作用，使培养时间明显缩短3～4周，仅需平均10天即可得出培养结果。本组结果表明，培养法检测的阳性率为36.6%，高于涂片镜检法(P<0.01)，而培养法与镜检联合检测的阳性率为41.0%，高于培养法(P<0.05)。同时，痰标本的留取时间对培养法检出率有很大影响，晨痰的检出率明显高于即时痰(P<0.01)。
总之，联合应用痰直接涂片镜检与培养法对结核分枝杆菌进行检测，同时重视和确保痰标本的留取质量，将对进一步提高肺结核病的实验室诊断水平具有重要临床意义。
参考文献
1 刘志辉，罗鲁.结核病实验室诊断现状及展望.中国防痨杂志，2003，25(3)：38-40.
2 邱清连，宋荣耀.枣庄市1993～2001年耐药肺结核病流行病学调查.中国全科医学，2002，5(8)：641-642.
3 赵勇.老年人单纯支气管内膜结核47例临床及误诊分析.中国综合临床，2004，20(12)：1144.
4 张卫红，石胜，黄小霞，等.综合医院与结核病防治所痰涂片抗酸杆菌检出率比较.中国基层医学，2004，11(6)：700.
5 Tanil Kocagoz，Engln Yilmac Seref Ozkara，et al.Detection of mycobacterium tuberculosis in sputum samples by polymerase chain rection using a simplified.J of Clinical Microbiology，1993，31(6)：1435.
6 肖爱清，侯双翼，李国明，等.结核分枝杆菌镜检、培养和PCR技术诊断结核病的临床评估.中国防痨杂志，2003，25(2)：68-70.
7 施鸿生，王鹏飞，陆镪，等.传染性肺结核病例不同检出和诊断方法评价.中华结核和呼吸杂志，1997，20(5)：301-304.
关键词 结核 肺 分枝杆菌 痰 培养
肺结核作为我国单因素致死数最高的传染性疾病，由于耐药结核杆菌出现、人口众多且流动性大等因素，目前的疫情呈上升趋势[1，2]。世界卫生组织宣布“全球处于结核病紧急状态”，为进一步推动全球预防与控制结核病的宣传活动，于1995年底决定把每年的3月24日定为“世界防治结核病日”，并于1997年宣布了一项被称为“直接观察短期疗程”的行动计划，其目标是治愈95%的肺结核患者。肺结核的早期发现主要靠实验室诊断。我们对670例肺结核患者痰标本进行BACTEC-TB960快速培养系统与直接涂片镜检相结合检测，以进一步提高结核分枝杆菌的检出率。
材料与方法
标本来源：肺结核患者670例痰标本均来自长春市传染(结核)病医院2005年3月～2008年1月的住院患者。其中男399例，女271例，年龄8～86岁。
方法：①痰标本直接涂片采用Ziehl-Neelsen染色法(国际防痨协会及中国防痨协会推荐方法)，镜检结果采用结核病细菌学检验规程的有关标准报告。抗酸染色试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供。②BACTEC-TB960快速培养仪及所需试剂为美国BD公司产品，参照仪器操作手册进行检测。
统计学方法：采用SPSS10.0统计软件包进行统计处理，选X2检验。
结 果
痰涂片镜检与培养：670例肺结核患者痰涂片抗酸染色镜检，阳性165例，阳性率24.6%，BACTEC-TB960快速培养检查结核分枝杆菌阳性245例，阳性率36.6%。培养法检查的阳性率高于直接涂片镜检(P<0.01)，见表1。
痰涂片镜检与培养法联合检测：肺结核患者痰标本直接涂片镜检与培养法联合检测结核分枝杆菌，阳性率为41.0%(阳性275例，阴性395例)，与培养法检查阳性率36.6%(阳性245例，阴性425例)差异有统计学意义(P<0.05)。
即时痰与晨痰的培养检查结果：对309例肺结核患者的即时痰与晨痰进行了培养对照检查。结果：即时痰培养阳性101例，阳性率为32.7%，晨痰培养阳性144例，阳性率46.6%。晨痰培养的检出率明显高于即时痰(P<0.01)。
讨 论
痰涂片抗酸染色查找结核分枝杆菌作为细菌学检测的常规手段之一，简便、经济、快捷是其优点，但检出率低[3]而且标本的选取、涂片的质量以及显微镜检速度等人为因素都会较大地影响痰检质量，但作为现代防痨策略的重要组成部分，仍将作为检查结核杆菌的首选方法[4]。由于阳性涂片时痰液中菌量必须>1×104ml，其阳性率与患者排菌量明显相关。故为提高阳性率，我们采用了厚涂片法，结果对痰涂片抗酸染色镜检的阳性率为24.6%，与国内外文献报道一致[5，6]。
结核分枝杆菌培养在结核病细菌学诊断方面具有决定性意义，可以提高阳性率[7]。近年来，BACTEC-TB960作为一种标准化的培养系统，能促进分枝杆菌生长，并对其他细菌生长有抑制作用，使培养时间明显缩短3～4周，仅需平均10天即可得出培养结果。本组结果表明，培养法检测的阳性率为36.6%，高于涂片镜检法(P<0.01)，而培养法与镜检联合检测的阳性率为41.0%，高于培养法(P<0.05)。同时，痰标本的留取时间对培养法检出率有很大影响，晨痰的检出率明显高于即时痰(P<0.01)。
总之，联合应用痰直接涂片镜检与培养法对结核分枝杆菌进行检测，同时重视和确保痰标本的留取质量，将对进一步提高肺结核病的实验室诊断水平具有重要临床意义。
参考文献
1 刘志辉，罗鲁.结核病实验室诊断现状及展望.中国防痨杂志，2003，25(3)：38-40.
2 邱清连，宋荣耀.枣庄市1993～2001年耐药肺结核病流行病学调查.中国全科医学，2002，5(8)：641-642.
3 赵勇.老年人单纯支气管内膜结核47例临床及误诊分析.中国综合临床，2004，20(12)：1144.
4 张卫红，石胜，黄小霞，等.综合医院与结核病防治所痰涂片抗酸杆菌检出率比较.中国基层医学，2004，11(6)：700.
5 Tanil Kocagoz，Engln Yilmac Seref Ozkara，et al.Detection of mycobacterium tuberculosis in sputum samples by polymerase chain rection using a simplified.J of Clinical Microbiology，1993，31(6)：1435.
6 肖爱清，侯双翼，李国明，等.结核分枝杆菌镜检、培养和PCR技术诊断结核病的临床评估.中国防痨杂志，2003，25(2)：68-70.
7 施鸿生，王鹏飞，陆镪，等.传染性肺结核病例不同检出和诊断方法评价.中华结核和呼吸杂志，1997，20(5)：301-304.