观察谷氨酰胺如何通过促进骨骼肌MG53二聚化，从而对严重烧伤小鼠骨骼肌膜修复产生影响，并探讨其作用机制。
方法(1)动物实验。按随机数字表法(分组方法下同)将179只6～8周龄BALB/c雄性小鼠分为假伤组(43只)、烧伤组(73只)、烧伤＋谷氨酰胺组(63只)。将假伤组小鼠背部致假伤，将烧伤组和烧伤＋谷氨酰胺组小鼠背部造成Ⅲ度30%体表总面积烫伤(以下称烧伤)。烧伤＋谷氨酰胺组小鼠灌胃谷氨酰胺1 mg/kg，另2组小鼠灌胃等量氨基酸溶液，每天1次，持续14 d。伤后12 h，取10只烧伤组小鼠制备烧伤血清，用于后续细胞实验。假伤组在伤后即刻取10只小鼠，烧伤组和烧伤＋谷氨酰胺组分别在伤后5、10、14 d各取10只小鼠，心脏采血制备血清，然后处死取整块腓肠肌。伤后10 d，3组分别另取6只小鼠处死后取整块趾短屈肌。伤后5、10、14 d，3组分别另取9只小鼠处死后取整块腓肠肌。称取整块小鼠腓肠肌质量，考马斯亮蓝法检测小鼠腓肠肌总蛋白含量；双光子激光肌膜打孔检测小鼠趾短屈肌肌膜修复功能；放射免疫分析检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量；采用非还原性电泳-蛋白质印迹法检测小鼠腓肠肌中MG53二聚体及单体表达，蛋白质印迹法检测小鼠腓肠肌中内质网应激标志蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。(2)细胞实验。体外培养小鼠骨骼肌前体细胞C2C12，选第2代细胞进行实验。将细胞分为正常对照组、烧伤血清组、烧伤血清＋谷氨酰胺组，每组3皿，每皿1×103个细胞，正常对照组细胞加入1 mL含有体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液，烧伤血清组细胞加入1 mL含有体积分数10%烧伤血清的DMEM培养液，烧伤血清＋谷氨酰胺组细胞加入1 mL含有体积分数10%烧伤血清及4 μL终物质的量浓度为8 mmol/L的谷氨酰胺的DMEM培养液。培养24 h后，同前检测小鼠骨骼肌前体细胞分化后肌细胞膜修复功能。另取细胞同前分组及培养，每组3孔，每孔1×105个细胞，培养24 h后同前检测细胞中MG53二聚体及单体表达及细胞中内质网应激标志蛋白表达。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD-t检验、SNK检验。
结果动物实验。(1)与假伤组比较，烧伤组伤后5、10、14 d小鼠腓肠肌质量和总蛋白含量均明显降低(P<0.05)；与烧伤组比较，烧伤＋谷氨酰胺组伤后5、10、14 d小鼠腓肠肌质量和总蛋白含量均明显增加(P<0.05)。(2)与假伤组的0.9±0.4比较，烧伤组伤后10 d小鼠肌纤维内FM1-43荧光强度(7.8±0.4)明显升高(t＝7.75，P<0.05)；与烧伤组比较，烧伤＋谷氨酰胺组伤后10 d小鼠肌纤维内FM1-43荧光强度(4.0±0.4)明显降低(t＝－4.31，P<0.05)。(3)与假伤组比较，烧伤组伤后5、10、14 d小鼠血清TNF-α、IL-6含量均明显增加(P<0.05)；与烧伤组比较，烧伤＋谷氨酰胺组伤后5、10、14 d小鼠血清TNF-α、IL-6含量均明显减少(P<0.05)。(4)与假伤组(56.97±2.82、44.89±4.72、42.46±1.06，14.26±0.99、62.36±2.74、29.45±0.84)比较，烧伤组伤后5、10、14 d小鼠腓肠肌中MG53二聚体和单体表达均明显降低(6.16±0.25、26.09±1.22、28.86±1.53，5.63±0.25、26.74±0.79、4.41±0.52，P<0.05)；与烧伤组比较，烧伤＋谷氨酰胺组伤后10、14 d小鼠腓肠肌中MG53二聚体表达(36.79±1.44、43.96±1.62)和伤后14 d小鼠腓肠肌中MG53单体表达明显升高(13.16±2.17，P<0.05)。与假伤组比较，烧伤组伤后5、10、14 d小鼠腓肠肌中CHOP、GRP78蛋白表达明显升高(P<0.05)；与烧伤组比较，烧伤＋谷氨酰胺组伤后5、10 d小鼠腓肠肌中CHOP、GRP78蛋白表达均明显降低(P<0.05)。细胞实验。(1)与正常对照组的1.76±0.25比较，烧伤血清组培养24 h细胞FM1-43荧光强度(9.46±1.22)明显升高(t＝12.28，P<0.05)；与烧伤血清组比较，烧伤血清＋谷氨酰胺组培养24 h细胞FM1-43荧光强度(4.71±0.45)明显降低(t＝－7.59，P<0.05)。(2)正常对照组、烧伤血清组、烧伤血清＋谷氨酰胺组细胞培养24 h MG53单体表达相近(P>0.05)。与正常对照组(58.5±1.8)比较，烧伤血清组培养24 h细胞MG53二聚体表达明显降低(14.1±1.4，P<0.05)，与烧伤血清组比较，烧伤血清＋谷氨酰胺组培养24 h细胞MG53二聚体表达明显升高(30.9±0.6，P<0.05)。与正常对照组比较，烧伤血清组培养24 h细胞CHOP、GRP78蛋白表达明显升高(P<0.05)；与烧伤血清组比较，烧伤血清＋谷氨酰胺组培养24 h细胞CHOP、GRP78蛋白表达明显降低(P<0.05)。
结论谷氨酰胺能通过减轻严重烧伤小鼠内质网应激促进MG53二聚化，加速骨骼肌膜修复，减轻骨骼肌局部炎症反应，减少骨骼肌消耗。