【摘 要】
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目的:探讨在不同成熟状态下树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的外泌体(exosomes,Dex)的制备、提取及体外功能鉴定.方法:F344大鼠骨髓来源DC培养6后分为2组,一组为未成熟树
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院普外科,江苏,南京,210029
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目的:探讨在不同成熟状态下树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的外泌体(exosomes,Dex)的制备、提取及体外功能鉴定.方法:F344大鼠骨髓来源DC培养6后分为2组,一组为未成熟树突状细胞组(immature DC,imDC):直接收集上清;一组为成熟树突状细胞组(matureDC,mDC):每孔加入终浓度为1μg/ml的LPS培养48 h后,收集上清.然后用多步离心法分离得到Dex,流式细胞术检测两组Dex的表型,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组Dex与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养上清的白细胞介索10(IL-10)、白细胞介素12(It-12p70)的含量.混合淋巴细胞实验(MLR)检测共培养DCs刺激T细胞增殖能力.结果:与mDC分泌的exosomes相比,imDC分泌的exosomes表面中度表达MHC-Ⅱ类分子、低表达CD80、CD86、CIM0共刺激分子,而且与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养后刺激IL-12p70分泌能力较低(P<0.05),刺激T淋巴细胞增殖的能力也较mDC分泌的exosomes组弱(P<0.05).结论:不同成熟状态下的DC分泌的exogomes功能各异,可能在宿主的免疫反应中发挥不同的作用.
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