高尿酸对血管内皮细胞增殖凋亡作用及其机制研究

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chiale
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目的 研究尿酸对人脐静脉内皮细胞株(ECV304)增殖凋亡的影响及可能的机制分析.方法 (1)将人脐静脉内皮细胞株(ECV304)分为3组:溶剂对照组和低、高2个剂量实验组. 2个剂量实验组加入10,20 mg· dL-1的尿酸,溶剂对照组不作任何处理. (2)将ECV304分为4组:溶剂对照组、低剂量尿酸实验组 (10 mg· dL-1 ) 、p38抑制剂(SB)组(SB, 20 μmol·L-1 )和联合组(尿酸10 mg·dL-1 +p38抑制剂20 μmol·L-1 ).用CCK8 检测给予尿酸后ECV304细胞增殖水平;用蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3( Caspase 3)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化-p38 MAPK( p-p38 MAPK)的蛋白水平.结果 (1)在24 h 后,溶剂对照组和低、高 2 个剂量实验组的细胞增殖率分别为(100.00 ± 4.00)% , (80.52 ± 3.11)%和(60.49 ± 3.57)% ;这3组的Caspase-3蛋白表达分别为0.99 ± 0.11,1.26 ± 0.15 和1.59 ± 0.13;这3 组的 Cleaved caspase-3的蛋白表达分别为0.98 ± 0.14,1.70 ± 0.10和2.19 ± 0.11;这3组的p-p38 MAPK蛋白表达量为0.97 ± 0.15,1.81 ± 0.06和2.12 ± 0.10;这3组的p38 MAPK蛋白表达量为1.30 ± 0.11,1.00 ± 0.10和0.88 ± 0.04;上述指标:低、高2个剂量实验组与溶剂对照组相比,差异均有统计学意义( P <0.05 或P<0.01). (2)在24 h后,溶剂对照组、低剂量尿酸实验组、p38抑制剂组和联合组的细胞增殖率分别为 ( 100.00 ± 7.21 )% , ( 79.61 ± 3.34 )% , (109.30 ± 1.18)%和(90.69 ± 1.89)% ;这4 组的Caspase-3 的蛋白表达分别为1.24 ± 0.04, 1.63 ± 0.06, 1.04 ± 0.04 和 1.29 ± 0.03;这 4 组的 Cleaved caspase - 3 的蛋白表达分别为 0.93 ± 0.05, 1.49 ± 0.12, 0.73 ± 0.05 和0.97 ± 0.05;这4 组的 p -p38 蛋白的表达分别为1.16 ± 0.07,1.56 ± 0.07, 0.89 ± 0.06和 1.02 ± 0.05;这 4 组的 p38 蛋白的表达分别为 1.27 ± 0.12, 0.98 ± 0.02,0.88 ± 0.03 和0.69 ± 0.05;3 个处理组与溶剂对照组相比,Caspas-3表达差异均有统计学意义(均P<0.01);p38抑制剂组和联合组与溶剂对照组相比,Cleaved caspase-3和p38MAPK的表达差异均有统计学意义( P<0.05或P<0.01 );且与时间呈正相关.结论 高尿酸能够抑制血管内皮细胞ECV304的增殖并诱导凋亡,其机制可能与p38 MAPK信号通路有关.
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