通俗环毛蚓抗血栓活性蛋白成分的快速富集及活性考察

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gongjuntao
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目的:以中药地龙品种中的通俗环毛蚓为研究对象,对其蛋白总提物进行纯化富集以获得抗血栓活性蛋白成分,命名为PvQ。对PvQ进行抗血栓活性研究,以期为地龙的抗血栓物质基础研究提供参考。方法:采用AKTA-Pure蛋白纯化系统,以体外活性为导向,富集通俗环毛蚓PvQ;采用纤维蛋白平板法、纤维蛋白原-凝血酶时间法(Fibg-TT法)对PvQ的纤溶及抗凝活性进行测定;利用体外血栓溶解试验评价PvQ对体外血栓的溶解能力,同时,考察了不同温度及pH对PvQ活性的影响。结果:成功富集得到通俗环毛蚓PvQ,活性测定表明其具有显著的纤溶及抗凝活性。体外血栓试验结果显示,37 ℃孵育5 h后PvQ可水解超过80%的血栓块。此外,温度和pH对于PvQ活性影响显著,在>60 ℃或酸性条件(pH<7)下PvQ活性显著降低或失活,而在<50 ℃及碱性条件时PvQ活性不受影响。结论:建立了可行的通俗环毛蚓PvQ的制备方法,其可同时作用于纤维蛋白和纤维蛋白原,从而发挥双重纤溶作用,表现出良好的纤溶及抗凝活性,可为PvQ治疗血栓性疾病提供科学阐释,并为地龙抗血栓蛋白类产品的开发提供参考。
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