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以大孔树脂D101固定化中性脂肪酶，研究了固定化条件对酶催化活性的影响，得到了最佳固定化条件：给酶量为90IU／g，固定化温度为35℃，时间为12h，此时固定化酶的活力回收约为60％。固定化酶的半失活温度由游离酶的53℃提高到57℃，最适反应温度和最适pH分别由42℃上升至44℃和由7．5下降到7．3。对固定化中性脂肪酶在生物柴油合成中应用也进行了初步研究。