【摘 要】
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目的:探索辐射介导下He La细胞中Cdc25B与IER5蛋白表达的关系。方法:用4 Gyγ射线分别照射正常He La细胞和IER5-si RNA-He La细胞,收集照射后0、0.5、2、4、8、12、16、24、3
【机 构】
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中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所,军事医学科学院放射与辐射医学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金(31170806,31640022,30770533,31770907),北京市自然科学基金(7092013,7172146)
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目的:探索辐射介导下He La细胞中Cdc25B与IER5蛋白表达的关系。方法:用4 Gyγ射线分别照射正常He La细胞和IER5-si RNA-He La细胞,收集照射后0、0.5、2、4、8、12、16、24、36 h的细胞样本,并设未照射细胞为对照组。采用q PCR法检测照射后Cdc25B m RNA的表达;Western blot检测细胞内IER5和Cdc25B蛋白的表达;流式细胞术检测照射后G2期细胞周期阻滞情况。结果:q PCR结果显示,照射后0.5~24 h内,与对照组相比,正常He La细胞内Cdc25B m RNA在0.5 h先下降2 h再上升之后再下降,差异均有统计学意义(P均<0.05);在IER5-si RNA-He La细胞内Cdc25B m RNA在0.5 h先下降后再上升,差异均有统计学意义(P均<0.05,2 h组除外)。Western blot结果显示,照射后0.5~24 h内,与对照组相比,正常He La细胞内Cdc25B蛋白从2 h开始上升8 h开始下降,差异有统计学意义(P均<0.01);IER5-si RNA-He La细胞内Cdc25B蛋白从0.5 h开始下降8 h开始逐渐上升,差异有统计学意义(P均<0.01,24 h除外)。照射后0~36 h内,与对照组相比,正常He La细胞与IER5-si RNA-He La细胞的IER5蛋白表达水平分别在照后8 h与0 h后开始出现明显上升,差异均具有统计学意义(P均<0.05);而Cdc25B蛋白表达水分别在照射后8 h与0 h后开始出现下降,差异均具有统计学意义(P均<0.05),正常He La细胞与IER5-si RNA-He La细胞中Cdc25B蛋白与IER5蛋白的表达分别从8 h与0 h后开始呈现负相关关系(r分别为-0.740和-0.669,P均<0.01),当两种细胞中Cdc25B蛋白表达量下降时,G2期细胞周期阻滞比例升高(P<0.05)。结论:辐射介导下He La细胞中Cdc25B蛋白表达变化是由Cdc25B m RNA变化引起的,并且Cdc25B与IER5蛋白表达呈负相关关系。
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