【摘 要】
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目的:探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人足细胞(AB 8/13)自噬的影响. 方法:体外培养人足细胞株,采用不同浓度的AngⅡ(10-8～10-6 mol/L)刺激人足细胞24h和
【机 构】
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第三军医大学新桥医院肾内科 重庆,400037第三军医大学全军免疫研究所;
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目的:探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人足细胞(AB 8/13)自噬的影响. 方法:体外培养人足细胞株,采用不同浓度的AngⅡ(10-8～10-6 mol/L)刺激人足细胞24h和固定浓度AngⅡ(10-7moVL)刺激不同时间(0h、6h、12h、24h、36h),以及特异性自噬阻断剂3-MA(5 mmol/L)和不同浓度(10-8～1O-6mol/L)法舒地尔进行干预.免疫荧光法和Westem印迹法检测自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、Beclin-1]的表达变化. 结果:AngⅡ可刺激足细胞LC3B、Beclin-1蛋白表达上调,且呈剂量、时间依赖性(P＜0.05),在浓度10-7mol/L AngⅡ和时间24h时达高峰.3-甲基腺嘌呤(3-MA)能明显降低AngⅡ引起的LC3B蛋白表达(P＜0.01).法舒地尔本身对足细胞自噬没有影响,但可以明显下调AngⅡ诱导的足细胞LC3B和Beclin-1蛋白表达(P＜0.05),10-7mol/L时效果最明显. 结论:AngⅡ可诱导人足细胞自噬增强,3-MA和法舒地尔均可抑制此过程的发生,提示Rho激酶途径可能参与了AngⅡ诱导的足细胞自噬过程.
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