基于p53—mdm2复合物结构的mdm2阻断剂的初步探讨

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目的:寻找基于p53-mdm2复合物晶体结构的mdm2抑制剂,使p53释放出来,发挥其抗癌活性。方法:根据已知的p53-mdm2复合物晶体的空间结构,在计算机上模拟设计出23个非肽小分子化合物。将p53的全长开放阅读框(ORF)和mdm2的部分ORF克隆进原核表达载体,异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达。金属螯和层析柱纯化蛋白。Western blot检测蛋白的质量,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及标准曲线法进行蛋白定量。用ELISA方法检测非肽小分子化合物与mdm
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