论文部分内容阅读
为了在Epstein-Barr病毒（EBV）172kb的基因组中引入突变以研究基因功能，建立了一种简单有效的基因操作方法。在载体pcDNA3．1（＋）上操作，将两端含有重组蛋白FLP识别位点（FRT）的卡那霉素筛选标记基因（kan）与鼻咽癌（NPC）来源的、包含LMP1基因全长ORF的gDNA“无缝”连接（无外源序列插入）。连接后的kan-LMP1线性DNA片段经转化、由入噬菌体中redαβγ系统介导在E．coli中发生同源重组（ET克隆），用kan-LMP1替代了BAC—EBV（p2089）中相应的LM