大鼠肺表面活性蛋白C基因的克隆及原核表达

• 作 者: 唐炜 卢红艳 高楚楚
• 机 构: 江苏大学附属医院江苏镇江212000
• 出 处: 临床儿科杂志
• 发表日期: 2014年2期
• 关键词: 高氧 肺发育不良 大鼠 hyperoxiabronchopulmonary dysplasiarat

目的：构建高氧下早产大鼠肺表面活性蛋白C基因原核表达质粒，实现其在大肠杆菌中的表达。方法孕21 d SD早产大鼠，生后12 h暴露于85%高氧中，7 d后处死，取肺组织，提取RNA，并合成cDNA，进行PCR扩增，克隆进pMD18-T载体，经过酶切和测序验证，成功构建原核表达载体pET-28a（＋）-sp-c，重组质粒在大肠杆菌BL21菌株中经IPTG诱导表达，SDS-PAGE及Western blotting分析检测表达产物。结果经酶切和测序验证，成功构建pET-28a（＋）-sp-c质粒，高效表达出相