hSesn1基因真核表达载体构建及蛋白的表达和定位

来源 :医学研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ppmeng

【摘要】

：

目的构建人源的Sesnl真核表达载体同时检测融合蛋白在COS-7细胞系内的表达和定位。方法提取工具细胞系HeLa的mRNA，进而反转录成为cDNA。聚合酶链反应方法扩增人源Sesnl基因的c

【作者】

：

沈涛巴根李妍杨蕾郭然陈之光郭洲洋付勤

【机构】

：

中国医科大学附属盛京医院骨科,中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室、细胞生物学卫生部重点实验室

【出处】

：

医学研究杂志

【发表日期】

：

2017年6期

【关键词】

：

hSesnl WESTERN blot绿色荧光蛋白质粒构建 hSesnl Western blot GFP Plasmid construction

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目的构建人源的Sesnl真核表达载体同时检测融合蛋白在COS-7细胞系内的表达和定位。方法提取工具细胞系HeLa的mRNA，进而反转录成为cDNA。聚合酶链反应方法扩增人源Sesnl基因的cDNA全长片段，将其克隆于pEGFP-C1真核表达载体中。进一步将已构建好的重组表达载体进行双酶切以及测序鉴定，继而转染到工具细胞系COS-7中，进行Westernblot方法检测。最后应用激光共聚焦扫描显微镜方法来观察pEGFP-hSesnl在COS-7细胞中的定位情况。结果hSesnl基因cDNA全长片段克隆至pE

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