研究间充质干细胞(MSC)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对肺微血管内皮细胞(HPMECs)通透性的作用及机制。
方法将MSC缺氧培养24 h，收集MSC培养液，加入HGF抗体。将5×104个HPMECs种植到transwell小室上层，培养2～3 d形成内皮细胞单层，与MSC培养液共培养24 h，再加入脂多糖。将HPMECs分为空白对照组、脂多糖组、MSC组及抗HGF抗体组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测MSC培养液中HGF浓度，采用异硫氰酸荧光素(FITC)－葡聚糖法检测HPMECs通透性，采用western blot法检测内皮细胞连接血管内皮钙黏蛋白和闭锁蛋白，观察内皮细胞通透性，采用膜连蛋白V－异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V－FITC/PI)法和3－(4，5－二甲基噻唑－2)－2，5－二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测内皮细胞凋亡及增殖。
结果与脂多糖组(4.15±0.88)比较，MSC组HPMECs通透性降低(1.56±0.36，P<0.01)；抗HGF抗体组HPMECs通透性较MSC组升高(3.11±0.74，P<0.05)。MSC组血管内皮钙黏蛋白(0.71±0.05)及闭锁蛋白(0.96±0.05)的表达明显高于脂多糖组(0.38±0.19，0.51±0.02，均P<0.05)，抗HGF抗体组中这种作用被明显抑制(P<0.05)。与脂多糖组(17.09±1.89)比较，MSC组内皮细胞凋亡减少(6.82±1.80，P<0.05)，抗HGF抗体组中减少内皮细胞凋亡的作用被抑制(12.07±0.98，P<0.01)。与脂多糖组(0.47±0.09)比较，MSC组血管内皮细胞增殖活力增强(0.94±0.09，P<0.05)；抗HGF抗体组中增殖作用受到抑制(0.69±0.29，P<0.05)。
结论MSC旁分泌HGF可降低肺微血管内皮细胞通透性，其可能机制为保护肺血管内皮细胞间连接、促进血管内皮细胞增殖及抑制内皮细胞凋亡。