荧光定量PCR测定粗品肝素钠DNA提取液中反刍基因及猪基因的浓度

• 作 者: 李宁 李丽红 米文强 张雪霞 任风芝 刘建芬
• 机 构: 华北制药集团新药研究开发有限责任公司,华北制药华坤河北生物技术有限公司
• 出 处: 化学与生物工程
• 发表日期: 2021年1期
• 关键词: 粗品肝素钠 荧光定量PCR 种源鉴别 crude heparin sodium fluorescence quantitative PCR species id

采用细胞裂解和蛋白酶K消化技术,结合DNA制备柱选择性吸附DNA的方法提取粗品肝素钠中的动物DNA,将DNA标准溶液、粗品肝素钠DNA提取液分别与相应的PCR试剂混合,进行PCR扩增,测定粗品肝素钠DNA提取液中反刍基因及猪基因浓度。结果表明,反刍基因浓度在0.01~1000 pg·μL-1范围内线性关系良好,猪基因浓度在0.1~10000 pg·μL-1范围内线性关系良好。该方法具有良好的专属性、准确度、精密度,适用于粗品肝素钠动物来源的种属鉴别。