稳定表达AT1R基因且分泌Aβ的HEK293细胞株构建

• 作 者: 王变荣 张颖冬 石静萍
• 机 构: 南京大学医学院神经病学系,江苏,南京,210093;南京医科大学附属脑科医院神经内科,江苏,南京,210029
• 出 处: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 发表日期: 2010年12期
• 关键词: 血管紧张素Ⅱ1型受体 APP-PS1-HEK293 基因转染 基因表达

目的:用人血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因转染表达人Aβ前体蛋白(APP)及早老素蛋白1(PS1)的人胚肾293(APP-PS1-HEK293)细胞,建立稳定转染细胞系.方法:利用真核表达载体pcDNA3.1-AT1R以阳离子脂质体法转染APP-PS1-HEK293细胞,pcDNA3.1-EGFP为阴性对照,通过G418(600 μg/ml)选择培养,建立稳定转染细胞系,RT-PCR、细胞免疫荧光及Western blot检测转染的AT1R的表达.结果:pcDNA3.1-AT1R稳定转入APP-PS1-HEK293细胞,稳定成功表达目的基因.结论:稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究AT1R对Aβ分泌的影响及其在阿尔茨海默病发病机制探讨中提供了良好实验基础.