新型抗ErbB2、抗CD16三价双特异性抗体的构建及功能鉴定

• 作 者: 陆寒 解志刚 王明丽 施明 胡美茹 于鸣 马远方 沈倍奋 郭
• 机 构: 军事医学科学院基础医学研究所细胞免疫学实验室,河南大学细胞与分子免疫学重点实验室,新加坡国立大学医院医学部
• 出 处: 西安交通大学学报：医学版
• 发表日期: 2008年5期
• 关键词: 双特异性抗体 ERBB2 CD16 肿瘤免疫治疗 bispecific antibodyErbB2CD16tumor immunotherapy
• 基金项目: 国家基础研究发展规划项目“973”资助项目（No.2006CB504305）,国家高技术研究与发展项目“863”资助项目（No.2006AA02A245）,国家自然科学基金资助项目（No.30571716和No.30771981）

目的构建一种新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb。方法构建重组载体pET22b（＋）/BsAb;转化大肠杆菌BL21（DE3）,获得重组蛋白的表达,通过包涵体复性纯化蛋白。应用悬浮培养系统扩增稳定表达抗人CD16 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株（CG5细胞）和稳定表达抗人ErbB2 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株（HG2细胞）,通过rProtein A Sepharose Fast Flow亲和层析柱纯化融合蛋白,应用流式细胞术分析BsAb的结合能力。结果该BsAb可在大肠杆菌BL21（