高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TA-12株ORF6基因的克隆、鉴定及真核表达

• 作 者: 王彤彤 汪晓飞 李心安 田国宁 刘立涛 王广文 李宁 王方昆
• 机 构: 山东农业大学动物科技学院,潍坊出入境检验检疫局
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2013年11期
• 关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF6蛋白 真核表达 HP-PRRSV ORF6 protein Eukaryotic expression
• 基金项目: 国家自然科学基金项目（30901063）

旨在获得HP—PRRSVTA-12（GenBank登录号：HQ416720）分离株ORF6蛋白的高效表达，将HP—PRRSVTA-12分离株的ORF6基因克隆到载体PfastBacHTB，并经转座进入Ecoli舍有杆状病毒质粒Bacmid的DH10Bac^TM细胞株，通过蓝白斑筛选和PCR鉴定出阳性重组杆粒，再将提取的重组杆粒Bacmid．ORF6转染昆虫细胞sf9，使其表达ORF6蛋白。经Westernblot鉴定，在感染重组杆状病毒gg4天ORF6g-Cz表达量最大，达到0．05鹏／皿。表达的ORF6