【摘 要】
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目的建立检测不同菌种细菌的 16S-23S rRNA基因区间的特异图谱.方法应用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)、分子克隆及测序技术,对临床常见的代表20
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目的建立检测不同菌种细菌的 16S-23S rRNA基因区间的特异图谱.方法应用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)、分子克隆及测序技术,对临床常见的代表20个属26个种的标准菌株及相应的临床分离菌株共61株进行PCR扩增,同时对临床标本进行培养并与PCR-RFLP比较,探讨其在临床应用中的价值.结果 26株不同的标准菌株行PCR扩增后,分别出现1条带,2条带,3条带及多条带的不同DNA 图谱,其敏感性为2.5 CFU,与人类基因组DNA、真菌及病毒无交叉反应.其中14种菌经PCR扩增即可区分,另10种经Hinf I或Alu I 酶切后才能区分.肺炎克雷伯菌与坚韧肠球菌间的差异在第779位碱基上不同,Xma Ⅲ酶能进行区别.临床42例血培养15例阳性,阳性率35.7%;而PCR阳性27例,阳性率达64.3%,其阳性率明显高于血培养(P
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