【摘 要】
：
目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用.方法:首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体.再将重组表达载体转入大肠杆菌中诱导表达蛋白,并亲和层析、凝胶过滤层析纯化得到VAV2-DH和CDC42蛋白,最后利用鸟嘌呤核苷酸交换试验来验证VAV2-DH的鸟苷酸交换活性,并采用等温滴定量热技术检测这2种蛋白质相互作用的亲和力和热力学参数.结果:VAV2-DH
【机 构】
：
西南医科大学临床医学院,泸州646000;四川省医学科学院·四川省人民医院分子遗传中心,成都610072
论文部分内容阅读
目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用.方法:首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体.再将重组表达载体转入大肠杆菌中诱导表达蛋白,并亲和层析、凝胶过滤层析纯化得到VAV2-DH和CDC42蛋白,最后利用鸟嘌呤核苷酸交换试验来验证VAV2-DH的鸟苷酸交换活性,并采用等温滴定量热技术检测这2种蛋白质相互作用的亲和力和热力学参数.结果:VAV2-DH和CDC42蛋白的平衡解离常数KD=(11.44±2.12) μmol/L,其中摩尔结合焓DH=(-224.33±95.48) kJ/mol、-TDS=(195.97±95.95) kJ/mol、吉布斯自由能DG=(-28.30±0.49)kJ/mol.结论:VAV2-DH和CDC42蛋白属于中等强度的相互作用,是一个焓驱动的结合过程.
其他文献
目的:探究miR-149-5p对人口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞凋亡、上皮-间质转换(epithe-lial-mesenchymal transition,EMT)及微管形成的影响及作用机制.方法:miR-149-5p mimic(mimic)和pcDNA-FGF5(FGF5)单转或共转CAL-27细胞系,RT-PCR、Western blot检测FGF5表达;双荧光素酶报告实验验证miR-149-5p和FGF5靶向关系;流式细胞术检测细胞凋亡率,
在新医改的推动下,公立医院的管理模式也面临变革,为保障公立医院转变功能定位,提升公共医疗服务效能,防范腐败,要求公立医院注重强化内部财会监督,发挥监督刚性为管理和服务赋能.新时代,财会监督被赋予新的历史使命,是其他监督的重要支撑,为积极践行“健康中国”战略,公立医院要转变观念,理清思路,将财会监督融入内部管理的各个环节,协同内部管理和监督,以推动医改深化落实,实现公立医院永续发展.本文主要围绕公立医院进行分析,探讨内部财会监督体系完善的有效策略,为公立医院治理效能提升提供指导和借鉴.
阿尔茨海默病(Alzheimer\'s disease,AD)是一种不可逆的神经系统退行性病变,主要表现为记忆、执行、语言等方面的损害,早期发现并干预可延缓疾病的进展.目前,临床上常用传统纸笔式神经心理量表评估患者认知功能,但其具有一定的主观性及局限性.人工智能自然语言处理(natural language processing,NLP)是一种融合语言学、计算机学及机器学习的认知评估工具,通过更加客观的分析人类语言来评估患者认知功能下降的程度,可以帮助临床医生早期识别轻度认知功能障碍(mild cog
新《政府会计制度》的实施可以说是我国政府会计改革的重要里程碑,对强化国家治理以及现代化服务型政府建设具有重要的意义.本文将从本年盈余与预算结余差异调节表编制的理论基础、技术要求以及差异分类出发,针对调节表编制过程存在的问题进行具体探讨.同时将会从事业单位出发,针对本年盈余与预算结余差异调节表的整个编制环节进行一定的探讨分析,总结出具体的编制经验,为其他单位落实政府会计本年盈余与预算结余差异调节表提供重要参考.
随着网络的发展,高职院校在开展教学工作的过程中积极地应用互联网技术,通过线上线下结合混合教学模式来更好地提升教学效果.本文对线上线下混合教学模式的优势进行深入分析,并对目前高职财会类专业线上线下混合教学模式中存在的相关问题进行深入的研究分析,并提出了针对性的解决意见.
当今社会,改革和创新已成为大势所趋,面对新的趋势和新的环境,企业要想长久地发展下去,必须在行业中占据优势地位.企业的财务管理水平与市场竞争力的强弱息息相关,想要确保企业利益的最大化,实现企业的可持续发展,维持市场经济的良性循环必须建立良乎的内部控制机制.本文以财务风险内部控制的理论为基础,结合企业财务风险管理的内部控制现状,从企业的内控制度、财务管理的风险、信息披露机制、审计体系的建设等角度详细分析现阶段企业财务风险和内部控制存在的问题和不足,并针对具体的问题提出切实可行的解决方案,为我国企业的持续发展提
目的:通过构建大鼠糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)模型探究胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide 1,GLP-1)类似物利拉鲁肽对DPN大鼠坐骨神经聚腺苷二磷酸核糖聚合酶/激活核因子-κB(poly ADP-ribose poly-merase/nuclear factor kappa-B,PARP/NF-κB)表达的影响.方法:SD大鼠84只,随机选12只作为正常组;其余大鼠均采用链脲佐菌素诱导建立DPN模型.建模成功后,抽
目的:探索11C-匹兹堡化合物B正电子发射断层扫描成像([N-methyl-11C]-2-(4-methylaminophenyl)-6-hydroxyben-zothiazole,positron emission tomography,\"C-PIB-PET/CT)与神经心理量表在轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI)和阿尔茨海默病(Alzheimer\'s disease,AD)的关系.方法:选取吉林大学中日联谊医院神经内科2018年1月至2020年1
目的:探讨香芹酚对自发性2型糖尿病db/db小鼠星形胶质细胞损伤的保护作用.方法:选择8周龄雄性db/db小鼠20只,随机分为模型组和香芹酚组,每组10只,随机抽取10只db/m小鼠为对照组.香芹酚组小鼠给予香芹酚(20 mg/kg)灌胃,对照组和模型组分别给予等量生理盐水灌胃,每天灌胃1次,连续给药6周.利用免疫组化法标记胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP),观察不同分组中海马CA1区星形胶质细胞形态的病理改变.免疫组化法检测对照组、模型组和香芹酚
在社会主义市场经济大环境下,地质勘查单位的竞争日趋激烈,如何提高自身效益、增强竞争力、实现长远发展成为当务之急.成本作为影响单位利益的关键因素,强化成本管控自然成为重中之重.本文从管理会计在地质勘查单位成本管控中的应用着手,重点探讨管理会计促进成本管控水平提升的相关措施.