细胞DNA中8-OH—dG的毛细管区带电泳检测方法的研究

• 作 者: 徐永俊 徐顺清 周宜开
• 机 构: 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所,华中科技大学同济医学院环境医学研究所
• 出 处: 卫生研究
• 发表日期: 2005年5期
• 关键词: 毛细管区带电泳(CZE) 8-羟基-2’-脱氧鸟嘌呤核苷(8-OH—dG) capillary zone electrophoresis 8-hydroxy-

目的以人肝肿瘤细胞HepG2为工具细胞,通过优化选择毛细管区带电泳的运行电压、温度、缓冲溶液pH值等条件,建立细胞DNA氧化损伤后8-OH-dG的毛细管区带电泳分离检测方法,并以此方法分别检测未经H2O2处理组与经15mmol/L H2O2处理组HepG2细胞DNA中8-OH-dG含量的变化.方法提取DNA采用饱和盐析法,避免经酚-氯仿抽提导致8-OH-dG的产生.DNA溶液中加入DNase Ⅰ、蛇毒磷酸二酯酶及碱性磷酸酶得到游离核苷,并经去蛋白,二乙醚抽提后用于HPCE分析.优化后的分析条件为:紫外检测