【摘 要】
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目的 观察抑制分离缺陷基因3(PARD 3)表达的宫颈癌细胞系SiHa增殖、凋亡、侵袭及迁移能力变化,并探讨其可能作用机制.方法 取对数生长期SiHa细胞分为siRNC组、siRNA1组及siRNA2组,分别用骨架质粒、PARD 3siRNA1(抑制PARD3基因表达)、PARD 3siRNA2(抑制PARD3基因表达)腺病毒真核载体转染.采用qRT-PCR法检测三组转染后细胞PARD3、JAK2 mRNA.培养24、48 h时采用Western Blotting法检测三组PARD3蛋白,培养48 h时检
【机 构】
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新疆医科大学第五附属医院病理科,乌鲁木齐830011
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目的 观察抑制分离缺陷基因3(PARD 3)表达的宫颈癌细胞系SiHa增殖、凋亡、侵袭及迁移能力变化,并探讨其可能作用机制.方法 取对数生长期SiHa细胞分为siRNC组、siRNA1组及siRNA2组,分别用骨架质粒、PARD 3siRNA1(抑制PARD3基因表达)、PARD 3siRNA2(抑制PARD3基因表达)腺病毒真核载体转染.采用qRT-PCR法检测三组转染后细胞PARD3、JAK2 mRNA.培养24、48 h时采用Western Blotting法检测三组PARD3蛋白,培养48 h时检测三组细胞JAK2、p-JAK2蛋白.采用CCK-8法观察三组细胞增殖情况,细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况.培养48 h时取各组细胞,采用Transwell小室观察细胞迁移、侵袭情况.结果 与siRNC组比较,siR-NA1组、siRNA2组PARD3 mRNA相对表达量低(P均<0.05);与siRNA1组比较,siRNA2组PARD3 mRNA相对表达量低(P<0.05).与siRNC组比较,培养48 h时siRNA1组、siRNA2组p-JAK2蛋白相对表达量均增加(P均<0.05).与siRNC组比较,培养24、48 h时siRNA1组、siRNA2组细胞的OD450值增加(P均<0.05).与siRNC组比较,siRNA2组细胞凋亡率降低(P<0.05).与siRNC组比较,培养48 h时siRNA1组、siRNA2组细胞迁移数、侵袭数增加(P均<0.05).结论 抑制PARD3表达的SiHa细胞细胞增殖能力升高、细胞凋亡能力降低、侵袭迁移能力增强.PARD3可能通过上调p-JAK2表达促进SiHa细胞的增殖、侵袭及迁移,抑制细胞凋亡.
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