单链抗体导向卵巢上皮癌进行靶向基因 转移的实验研究

来源 :现代妇产科进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenchenhao
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目的:探讨靶向性基因转移载体—含抗MUC-1单链抗体的慢病毒对MUC-1+卵巢上皮癌细胞系SKOV-3细胞进行基因转移的特异性,为卵巢上皮癌的靶向性基因治疗提供实验基础。方法:将针对SKOV-3细胞上抗原MUC-1的单链抗体基因构建到慢病毒包膜结构质粒(pM.TC.G),以报告基因绿色荧光蛋白(GFP)基因作为目的基因。用磷酸钙沉淀法进行Anti-MUC-1(ScFv)慢病毒包装,感染共培养的卵巢癌细胞SKOV-3(MUC-1+)和正常人成纤维细胞GF(MUC-1-),荧光显微镜下观察感染效果。竞争抑制实验即病毒感染前加入Anti-MUC-1单抗是否抑制病毒感染。结果:荧光显微镜下观察到Anti-MUC-1(ScFv)介导的慢病毒对共培养的SKOV-3(MUC-1+)和GF(MUC-1-)细胞的感染有明显差别,非Anti-MUC-1(ScFv)介导的慢病毒对共培养的SKOV-3(MUC-1+)和GF(MUC-1-)的感染未见显著性差别,证明Anti-MUC-1(ScFv)介导的慢病毒可对MUC-1+的卵巢细胞靶向性转染。病毒感染前加入Anti-MUC-1单抗则可抑制病毒靶向性感染。此竟争抑制实验表明,病毒感染是由其抗体组成部分介导,故有抗体靶向性。结论:Ani-MUC-1(ScFv)介导的慢病毒可对MUC-1+卵巢上皮癌细胞靶向性基因转移。
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