【摘 要】
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为建立甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法,本研究利用真菌DNA内源转录间隔区通用引物ITS1/ITS4扩增甘蔗黑顶柄锈菌DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,获得序列于NCBI网站进行比
【机 构】
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农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地一海南省热带作物栽培生理学重点实验室农业部儋州热带作物科学观测实验站,中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生
【基金项目】
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中国热带农业科学院橡胶研究所省部重点实验室/科学观测实验站开放课题（No.RRI-KLOF201506）
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为建立甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法,本研究利用真菌DNA内源转录间隔区通用引物ITS1/ITS4扩增甘蔗黑顶柄锈菌DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,获得序列于NCBI网站进行比对分析,并于该序列多态性丰富区域设计了2对引物PM2F/R、PM3F/R。通过对同寄主不同病原菌、以及不同属的锈菌DNA进行PCR检测以验证引物的特异性。结果表明,在优化的单一PCR反应体系与程序条件下,2对引物均仅能从甘蔗黑顶柄锈菌中扩增出约474 bp和363 bp的特异条带,而从其它真菌DNA中均扩增不出任何条带。进一
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