从噬菌体随机肽库中筛选及鉴定肺癌特异性多肽

• 作 者: 邓伟雄 罗时敏 蓝代颜 梁伟灿 臧林泉
• 机 构: 广东省广州市第一人民医院综合外科,广东省佛山市西樵山人民医院,广东药学院药科学院药理教研室
• 出 处: 广东医学
• 发表日期: 2009年4期
• 关键词: 噬菌体肽库 多肽 肺癌 NCI—H1299 减性筛选
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（编号：30572177）,教育部重点基金资助项目（编号：208105）,广东药学院“中青年骨干教师”专项基金（编号：208105）

目的利用Phage display随机肽库筛选出与肺癌NCI—H1299细胞特异性结合的多肽，并通过ELISA和免疫组化鉴定其特异性和亲和力，为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI—H1299为靶细胞，肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞，在37℃下对噬茵体随机十二肽库进行四轮减性筛选，挑取单克隆、扩增纯化噬菌体、并经ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力；对阳性克隆提取质粒，测序后合成多肽，多肽标记荧光素FITC，以其在肺癌组织芯片上鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定