用pBluescript SK（＋）质粒自制T—A载体对DD RT—PCR产物进行克隆

• 作 者: 周清平 李新波
• 机 构: 上海市计生所生物学实验室,上海医科大学生理学教研室
• 出 处: 中国现代医学杂志
• 发表日期: 1999年10期
• 关键词: T-A克隆 PCR产物 载体 PBS质粒 T-A Cloning PCR Products
• 基金项目: 美国纽约中华医学基金!No．90－527

ｍＲＮＡ差异显示技术可以显示ｍＲＮＡ表达水平的差异。为了对用ｍＲＮＡ差异显示技术得到的差异条带进行研究，该文用改良碱裂解法抽提ＰＢＳ质粒，用ＥＣＯＲ Ｖ将ＰＢＳ切成平头，ａｑ ＤＮＡ聚合酶的非模板依赖性，在ｄＴＴＰ存在的条件下，用切成平头的ＰＢＳ质粒自制了Ｔ－Ａ克隆载体，对用ｍＲＮＡ差异显示方法得到了差异条带进行了重组结果表明：用自制Ｔ－Ａ克隆载体对ＰＣＲ产物进行克隆的连接率较高，自制Ｔ－Ａ载体进