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为控制生鲜乳质量,加强入厂防控,对生牛乳β-内酰胺酶杯碟法关键步骤开展研究,提高检测准确性。采用微生物杯碟法测定生鲜乳中β-内酰胺酶,使用对青霉素类药物敏感的藤黄微球菌,利用舒巴坦特异性抑制β-内酰胺酶的活性,同时加入青霉素作对照,比对加入舒巴坦与未加入舒巴坦的样品产生的抑菌圈的大小来间接测定样品中是否含有β-内酰胺酶类药物。结果表明:不同来源藤黄微球菌活化最优时间不同;不同品牌β-内酰胺酶酶活力不同对实验结果有直接影响;青霉素标准溶液低温贮存时间最优为0~2 h;供试检测平板的最优倾注量为10~15 m