【摘 要】
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研究不同浓度胰岛素及不同培养时间对犬卵母细胞体外成熟率的影响,为改善犬卵母细胞体外培养体系提供参考,采用切割法收集卵巢表面卵丘一卵母细胞复合体(cumulus oocyte comp
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研究不同浓度胰岛素及不同培养时间对犬卵母细胞体外成熟率的影响,为改善犬卵母细胞体外培养体系提供参考,采用切割法收集卵巢表面卵丘一卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes,COCs),在含有0.6%葡萄糖的TCM199中添加不同浓度的胰岛素(0、3、6、9 IU/mL),38.5℃、5%CO培养箱内成熟培养,观察卵丘扩散程度,剥离卵丘细胞获得裸卵后,室温下固定15 min;Hoechst 33342染色,压片,荧光显微镜下观察核形态,用SPSS 14.0软件统计试验数据.不同浓度胰岛素培养48 h后,各组卵丘细胞扩散效果都不明显;卵母细胞核成熟期没有达到减数分裂中期(MⅡ),但是6 IU/mL胰岛素组生发泡破裂期(GVBD)比率(35.88%±14.63%)显著高于对照组(11.25%±9.75%);6 IU/mL胰岛素组延长培养时间至72和96 h后,M I-MⅡ期卵母细胞成熟率分别为13.33%±1.5%、20.8%±1.9%.以上结果表明,犬体外成熟培养基中添加胰岛素既没有提高犬卵母细胞核成熟到MⅡ期,也没有改善犬卵母细胞卵丘扩散效果.但是,在6 IU/mL浓度下延长培养时间.相对增加了成熟率.
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