论文部分内容阅读
水是生活的必须，水是生命的源泉，水对人的生命和健康至关重要，世界卫生组织调查指出：人类疾病80%与水有关，长期饮用不清洁的水，对人类的健康有害。
日常生活中与我们关系最密切的水就是生活饮用水，生活饮用水是指人类饮用和日常生活中的使用水，它是人类生存不可缺少的要素。
在城市，生活用水主要是自来水，自来水是指通过自来水处理厂净化、消毒后生产出来的符合国家饮用水标准的供人们生活、生产使用的水。它主要通过水厂的取水泵站汲取江河湖泊及地下水，地表水，并按照《国家生活饮用水相关卫生标准》，经过沉淀、消毒、过滤等工艺流程的处理，最后通过配水泵站输送到各个用户。
桶装水是近几年发展较快的生活饮用水，尤其是城市住宅集中区、学校、单位等人群较多的地方，广泛使用桶装水。桶装水是指采用自来水或抽取地下水，经过现代工业技术（反渗透、电渗析、蒸馏、树脂软化等）处理而成的纯净水或矿泉水，再经过灌装生产线灌装至PVC桶而得到的产品。
在农村，生活饮用水主要有三个方面，第一是集中式供水，也就是自来水，多数为单村供水，只有水源和管网，无净化消毒设施和水源水质监测措施；第二是井水，包括浅井水、深井水和引泉水，均不经过净化消毒处理而直接饮用；第三是地表水，包括江河水、湖库水、池塘水和水窖水。
菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的微生物集合而成。当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。菌落总数是指水样在营养琼脂培养基上36℃左右培养48小时后，所得1毫升水样所含菌落的总数。其单位是CFU。CFU是形成菌落的菌落个数，不等于细菌个数。菌落总数往往采用的是平板计数法，经过培养后我们数出平板上所生长出的菌落个数，从而计算出每毫升或每克待检样品中可以培养出多少个菌落。
菌落总数的多少代表了水被微生物污染的程度，菌落总数一旦超出国家标准规定范围，就可能危害人体健康安全。
本次水样分别取某地区城市自来水、农村生活饮用水（河水）和桶装水进行微生物菌落总数的测定。
一、菌落总数测定
（一）营养琼脂培养基的制备
1、设备和材料
高压蒸汽灭菌器、超净工作台、干热灭菌箱、恒温培养箱36℃士2℃ 、电炉、天平、菌落计数器、PH计、500毫升三角瓶、移液枪、平板（直径 9cm），刻度吸管，采样瓶等。
2、培养基成分：蛋白胨10克、牛肉膏3克、氯化钠5克、琼脂10克～20克、蒸馏水1000毫升。
3、制备过程：用少量水将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠溶解，然后加入热的蒸馏水700毫升左右，边加热边用玻璃棒搅拌，待水沸腾后加入琼脂，再加水至1000毫升，并不断搅拌直到混合液体呈半透明状，调整 pH为7.4～7.6，分装于三角瓶中，包扎瓶口后，放入高压蒸汽灭菌器中在103.43 kPa （121℃，15lb）条件下灭菌20分钟，储存备用。
（二）菌落总数测定步骤
分别采集城市自来水、桶装水和农村生活饮用河水、并按以下步骤进行操作：
1、水样的稀释
以无菌操作方法用灭菌吸管吸取l毫升充分混匀的水样，注入到盛有9毫升灭菌生理盐水的试管中，混匀制成1：10稀释液。吸取1毫升的1：10稀释液注入到盛有9毫升灭菌生理盐水的试管中，混匀成l：100的稀释液。吸取1毫升的1：100的稀释液注入到盛有9毫升灭菌生理盐水的试管中，混匀成l：1000的稀释液，混匀备用。每稀释一次，更换一支 1毫升灭菌吸管。
2、倾注平板
用一支1毫升的灭菌吸管吸取l毫升未经稀释的水样，注入灭菌平板中。用上述3种不同稀释度的水样，以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 1毫升，注人灭菌平板中，每个水样均做平行实验，再分别倾注约15毫升已融化且冷却至45℃左右的营养琼脂培养基，立即旋转摇动平板，使水样与培养基充分混匀，同时另取一个平板只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。待琼脂冷却凝固后，将平板翻转，倒置放入恒温培养箱内在36℃士1℃下培养48±2小时。
3、菌落计数
培养完成后，采用菌落计数器计数每个平板上的菌落总数，然后计算出每个水样同一稀释度的平均菌落数。
二、测定结果分析
根据国标GB 5749-2006《生活饮用水卫生标准》规定：菌落总数不得超过100个CFU/mL，根据国标GB 19298-2003《瓶（桶）装饮用水卫生标准》规定微生物菌落总数不超过50CFU/ml。
分析可得：该地区的城市自来水微生物菌落总数在国家标准范围内，桶装水微生物菌落总数超标，农村生活饮用水微生物菌落总数超标。
该地区城市自来水均经自来水处理厂净化、消毒处理，进入管网前按《生活饮用水衛生标准》实施严格的检测，所以微生物菌落总数均能控制在国家标准范围内。自来水消毒主要是去除水中致病微生物，以防止水中病原体对人体侵害。目前自来水消毒大都采用氯化法，所以自来水中会有少量或者微量的氯，我们通常打开自来水时会闻到一股氯气味。这种消毒方法已经有100多年的历史了，具有较完善的生产技术和设备，但氯化法消毒后的自来水能产生致癌物质，目前世界上安全的自来水消毒方法是臭氧消毒，不过这种方法的处理费用昂贵，而且经过臭氧处理过的水，它的保留时间有限。所以目前只有少数的发达国家才使用这种处理方法。
桶装水在出厂时微生物菌落总数均符合国家标准要求，但在使用时会加大染菌机会，其一，桶装水基本上都与饮水机配套使用，在使用过程中，放出多少水就会补充相同量的空气进入桶内，而环境中的空气每立方米中约有4000个细菌，这些细菌会造成桶装水的二次污染；其二，饮水机在生产中多未经过严密消毒，且在运输、销售过程中还会受到污染；其三，饮水机在单位或家庭内是处于裸露状态，因其结构不便进行消毒，尤其是放水口处长期接触空气且长期处于湿润状态，因而导致放出的常温水及冰水菌落总数超标，而放出的热水经过加热处理，微生物被杀死，菌落总数不会超标的。所以尽可能加热后再饮用而不要直接饮用。这就要求在使用时对饮水机要定期放空剩余积水，并进行必要的清洗、消毒、以利于减少细菌的污染。
该地区农村生活饮用水主要是河水，受周围环境污染较大，比如：生活垃圾污染、排污水沟污染、粪便污染等，造成微生物菌落超标。所以农村地区应加强水源保护，防止水源污染。要使当地居民喝到合格的饮用水关键是要改变当前的供水状况，采用集中供水系统，进行适当净化和消毒处理，从而加强对饮水水源的卫生防护，以保障饮水居民的身体健康。
日常生活中与我们关系最密切的水就是生活饮用水，生活饮用水是指人类饮用和日常生活中的使用水，它是人类生存不可缺少的要素。
在城市，生活用水主要是自来水，自来水是指通过自来水处理厂净化、消毒后生产出来的符合国家饮用水标准的供人们生活、生产使用的水。它主要通过水厂的取水泵站汲取江河湖泊及地下水，地表水，并按照《国家生活饮用水相关卫生标准》，经过沉淀、消毒、过滤等工艺流程的处理，最后通过配水泵站输送到各个用户。
桶装水是近几年发展较快的生活饮用水，尤其是城市住宅集中区、学校、单位等人群较多的地方，广泛使用桶装水。桶装水是指采用自来水或抽取地下水，经过现代工业技术（反渗透、电渗析、蒸馏、树脂软化等）处理而成的纯净水或矿泉水，再经过灌装生产线灌装至PVC桶而得到的产品。
在农村，生活饮用水主要有三个方面，第一是集中式供水，也就是自来水，多数为单村供水，只有水源和管网，无净化消毒设施和水源水质监测措施；第二是井水，包括浅井水、深井水和引泉水，均不经过净化消毒处理而直接饮用；第三是地表水，包括江河水、湖库水、池塘水和水窖水。
菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的微生物集合而成。当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。菌落总数是指水样在营养琼脂培养基上36℃左右培养48小时后，所得1毫升水样所含菌落的总数。其单位是CFU。CFU是形成菌落的菌落个数，不等于细菌个数。菌落总数往往采用的是平板计数法，经过培养后我们数出平板上所生长出的菌落个数，从而计算出每毫升或每克待检样品中可以培养出多少个菌落。
菌落总数的多少代表了水被微生物污染的程度，菌落总数一旦超出国家标准规定范围，就可能危害人体健康安全。
本次水样分别取某地区城市自来水、农村生活饮用水（河水）和桶装水进行微生物菌落总数的测定。
一、菌落总数测定
（一）营养琼脂培养基的制备
1、设备和材料
高压蒸汽灭菌器、超净工作台、干热灭菌箱、恒温培养箱36℃士2℃ 、电炉、天平、菌落计数器、PH计、500毫升三角瓶、移液枪、平板（直径 9cm），刻度吸管，采样瓶等。
2、培养基成分：蛋白胨10克、牛肉膏3克、氯化钠5克、琼脂10克～20克、蒸馏水1000毫升。
3、制备过程：用少量水将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠溶解，然后加入热的蒸馏水700毫升左右，边加热边用玻璃棒搅拌，待水沸腾后加入琼脂，再加水至1000毫升，并不断搅拌直到混合液体呈半透明状，调整 pH为7.4～7.6，分装于三角瓶中，包扎瓶口后，放入高压蒸汽灭菌器中在103.43 kPa （121℃，15lb）条件下灭菌20分钟，储存备用。
（二）菌落总数测定步骤
分别采集城市自来水、桶装水和农村生活饮用河水、并按以下步骤进行操作：
1、水样的稀释
以无菌操作方法用灭菌吸管吸取l毫升充分混匀的水样，注入到盛有9毫升灭菌生理盐水的试管中，混匀制成1：10稀释液。吸取1毫升的1：10稀释液注入到盛有9毫升灭菌生理盐水的试管中，混匀成l：100的稀释液。吸取1毫升的1：100的稀释液注入到盛有9毫升灭菌生理盐水的试管中，混匀成l：1000的稀释液，混匀备用。每稀释一次，更换一支 1毫升灭菌吸管。
2、倾注平板
用一支1毫升的灭菌吸管吸取l毫升未经稀释的水样，注入灭菌平板中。用上述3种不同稀释度的水样，以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 1毫升，注人灭菌平板中，每个水样均做平行实验，再分别倾注约15毫升已融化且冷却至45℃左右的营养琼脂培养基，立即旋转摇动平板，使水样与培养基充分混匀，同时另取一个平板只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。待琼脂冷却凝固后，将平板翻转，倒置放入恒温培养箱内在36℃士1℃下培养48±2小时。
3、菌落计数
培养完成后，采用菌落计数器计数每个平板上的菌落总数，然后计算出每个水样同一稀释度的平均菌落数。
二、测定结果分析
根据国标GB 5749-2006《生活饮用水卫生标准》规定：菌落总数不得超过100个CFU/mL，根据国标GB 19298-2003《瓶（桶）装饮用水卫生标准》规定微生物菌落总数不超过50CFU/ml。
分析可得：该地区的城市自来水微生物菌落总数在国家标准范围内，桶装水微生物菌落总数超标，农村生活饮用水微生物菌落总数超标。
该地区城市自来水均经自来水处理厂净化、消毒处理，进入管网前按《生活饮用水衛生标准》实施严格的检测，所以微生物菌落总数均能控制在国家标准范围内。自来水消毒主要是去除水中致病微生物，以防止水中病原体对人体侵害。目前自来水消毒大都采用氯化法，所以自来水中会有少量或者微量的氯，我们通常打开自来水时会闻到一股氯气味。这种消毒方法已经有100多年的历史了，具有较完善的生产技术和设备，但氯化法消毒后的自来水能产生致癌物质，目前世界上安全的自来水消毒方法是臭氧消毒，不过这种方法的处理费用昂贵，而且经过臭氧处理过的水，它的保留时间有限。所以目前只有少数的发达国家才使用这种处理方法。
桶装水在出厂时微生物菌落总数均符合国家标准要求，但在使用时会加大染菌机会，其一，桶装水基本上都与饮水机配套使用，在使用过程中，放出多少水就会补充相同量的空气进入桶内，而环境中的空气每立方米中约有4000个细菌，这些细菌会造成桶装水的二次污染；其二，饮水机在生产中多未经过严密消毒，且在运输、销售过程中还会受到污染；其三，饮水机在单位或家庭内是处于裸露状态，因其结构不便进行消毒，尤其是放水口处长期接触空气且长期处于湿润状态，因而导致放出的常温水及冰水菌落总数超标，而放出的热水经过加热处理，微生物被杀死，菌落总数不会超标的。所以尽可能加热后再饮用而不要直接饮用。这就要求在使用时对饮水机要定期放空剩余积水，并进行必要的清洗、消毒、以利于减少细菌的污染。
该地区农村生活饮用水主要是河水，受周围环境污染较大，比如：生活垃圾污染、排污水沟污染、粪便污染等，造成微生物菌落超标。所以农村地区应加强水源保护，防止水源污染。要使当地居民喝到合格的饮用水关键是要改变当前的供水状况，采用集中供水系统，进行适当净化和消毒处理，从而加强对饮水水源的卫生防护，以保障饮水居民的身体健康。