目的 研究犬骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)膜片和牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)膜片移植于裸鼠体内后BMMSC/PDLSC细胞活性的变化.方法 原代培养犬BMMSC和PDLSC,使用慢病毒分别转染绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)基因;对GFP-BMMSC和RFP-PDLSC经流式细胞术进行免疫表型鉴定,并进行成骨和成脂诱导分化鉴定;制备两种细胞的细胞膜片,经Bio-Gide胶原膜包裹并移植于裸鼠背部皮下,应用小动物活体荧光成像技术对比分析移植后第1、2、4、8周两种细胞膜片内细胞的GFP和RFP表达情况,并经组织学方法确认.结果 GFP标记的犬BMMSC和RFP标记的犬PDLSC表面抗原CD29和CD44均为阳性,CD34表达较低;两种细胞诱导后均能进行成骨和成脂分化;两种细胞制备成膜片并移植于裸鼠体内后,小动物活体荧光成像显示GFP-BMMSC在移植术后第1、2、4、8周平均光强依次减弱,分别为(83.1±3.1)×10b、(65.1±2.3)×106、(51.5±2.3)×106及(33.8±2.0)×106 ph/s;RFP-PDLSC在移植术后第1、2、4周平均光强也依次减弱,分别为(53.8±3.0)×106、(42.2±2.6)×1 06、(34.5±2.1)×106 ph/s,第8周平均光强[(45.1±2.9)×106 ph/s]与第4周相比显著增强(P＜0.01).组织切片及免疫组化检测发现移植后膜片中RFP-PDLSC的数量明显多于GFP-BMMSC.结论 经慢病毒转染荧光蛋白基因后的犬GFP-BMMSC和RFP-PDLSC具有相似的干细胞生物学特性,但PDLSC更耐受细胞膜片制备过程中的高密度培养微环境,与BMMSC相比细胞膜片技术更适用于PDLSC。
骨髓间充质干细胞和牙周膜干细胞膜片体内活性的动物实验
【摘 要】
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目的 研究犬骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)膜片和牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)膜片移植于裸鼠体内后BMMSC/PDLSC细胞活性的变化.方法 原代培养犬BMMSC和PDLSC,使用慢病毒分别转染绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基
【机 构】
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200072上海,同济大学口腔医学院牙周科·口腔生物医学及转化医学实验室,200072上海,同济大学口腔医学院牙周科·口腔生物医学及转化医学实验室
【出 处】
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中华口腔医学杂志
【发表日期】
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2014年49期
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