人MicroRNA-335阳性对照质粒真核表达载体的构建及意义

• 作 者: 温志红 代艳 何爽
• 机 构: 广西壮族自治区人民医院儿科,广西壮族自治区人民医院康复科
• 出 处: 中国临床新医学
• 发表日期: 2015年1期
• 关键词: 人MicroRNA-335 阳性对照 质粒 荧光素酶报告基因载体 pMIR-REPORT has-miR-335 Positive control Pla

目的 构建人MicroRNA-335（has-miR-335）阳性对照质粒表达载体。方法 根据与has-miR-335“种子区”完全匹配的序列设计并合成一对互补的寡聚核苷酸链,经过缓慢降温退火得到目的 小片段。将退火产物连接入荧光素酶报告基因载体p MIR-REPORT而得到has-miR-335阳性对照重组质粒。应用Lipofectamine 2000将has-miR-335阳性对照重组质粒、p MIR-REPORT空载体,分别与Pre-miRTMmicroRNA335 Precursor共转染至293