【摘 要】
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从Genscript软件预测的10个GFP报告基因序列特异性miRNA中随机选择1个,通过PCR法合成相应双链寡核苷酸,插入含鸡U6启动子的pRFPRNAiC载体,获得pRFPRNAiGFP;将pRFPRNAiGFP与pe
【机 构】
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江苏畜牧兽医职业技术学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏省昆山出入境检验检疫局
【基金项目】
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江苏省自然科学基金企业博士创新项目（编号：BK2009735）,江苏畜牧兽医职业技术学院博士启动基金（编号：ZD200908）.
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从Genscript软件预测的10个GFP报告基因序列特异性miRNA中随机选择1个,通过PCR法合成相应双链寡核苷酸,插入含鸡U6启动子的pRFPRNAiC载体,获得pRFPRNAiGFP;将pRFPRNAiGFP与peGFP-N1共转染COS-1、293-T、CEL和CEF细胞,在RT-PCR法确定miRNA表达后,根据转染细胞中GFP阳性细胞数及荧光强度变化,比较鸡U6启动子在哺乳动物源和禽源细胞中介导的miRNA沉默效率.结果显示,pRFPRNAiGFP在哺乳动物和禽源细胞中都能表达抑制性miRN
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