【摘 要】
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目的优化滤膜吸附洗脱法,富集检测模拟水样中的甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)。方法制备含有HAV的模拟水样,经阴、阳离子两种滤膜吸附之后分别采用摇床、涡流、超声及直接裂解法进行病毒的富集和洗脱,通过Taqman实时荧光定量PCR检测洗脱液中的HAV核酸,并对实验数据进行统计分析。结果当模拟水样中含有的病毒总量为300 TCID50时,阴、阳离子滤膜富集HAV的效果未发现显
【机 构】
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国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京 102206,国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京 102
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目的优化滤膜吸附洗脱法,富集检测模拟水样中的甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)。
方法制备含有HAV的模拟水样,经阴、阳离子两种滤膜吸附之后分别采用摇床、涡流、超声及直接裂解法进行病毒的富集和洗脱,通过Taqman实时荧光定量PCR检测洗脱液中的HAV核酸,并对实验数据进行统计分析。
结果当模拟水样中含有的病毒总量为300 TCID50时,阴、阳离子滤膜富集HAV的效果未发现显著差异(P=0.825>0.05),但是当模拟水样中的病毒含量提高至1500 TCID50和7500 TCID50时,阴离子滤膜富集后的病毒回收率高于阳离子滤膜(P<0.01)。另外,本研究还发现采用直接裂解的方式进行洗脱后,病毒的回收率达到(68.17±16.79)%,显著高于摇床、涡流和超声等方式(P<0.0001)。
结论无论采用阴离子或阳离子滤膜吸附,之后的洗脱过程对HAV的富集有至关重要的影响,通过直接裂解的方式洗脱病毒能够达到较好的回收效果。
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