【摘 要】
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探讨在肿瘤坏死因子a(TNF-α)作用下,粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)对蛋白激酶B(PKB)蛋白水平的影响.利用构建、转染FAK反义质粒来特异性降低SMMC-7721细胞的FAK含
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探讨在肿瘤坏死因子a(TNF-α)作用下,粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)对蛋白激酶B(PKB)蛋白水平的影响.利用构建、转染FAK反义质粒来特异性降低SMMC-7721细胞的FAK含量,及用Western杂交的方法来检测PKB的蛋白含量.文献报道TNF-α能够激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)而使PKB发生磷酸化.但是至于TNF-α对PKB蛋白水平的影响目前并无报道.研究发现,当用wortmannin特异性抑制PI3K活性后可以显著降低PKB的蛋白含量.提示PI3K对维持PKB的基础蛋白水平是必需的.但是TNF-α本身对PKB的蛋白水平无明显影响.而当用不同浓度的TNF-α和wortmannin处理SMMC-7721细胞时,发现PKB的蛋白含量随着TNF-α浓度的增加而降低.提示TNF-α可能除了通过P13K外,还可能通过另一条途径来下调PKB的表达.而当用FAK反义质粒转染SMMC-7721细胞后(FAK 下降了60%),发现在当用不同浓度的TNF-α处理的情况下,FAK反义质粒转染株AS-7721细胞的PKB含量降低为对照的70%;而在用TNF-α和wortmannin处理的情况下,下降为对照的40%～6O%.TNF-α能够通过PI3K及另一未知途径来影响PKB的蛋白水平.而FAK在TNF-α作用下能够不通过PI3K来影响PKB的蛋白水平.
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