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【中图分类号】R512.62 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）03-01774-02
前Sl蛋白（preS1），前s2蛋白和乙型肝炎病毒s抗原（HBsAg）三者共同构成乙型肝炎病毒（HBV的衣壳蛋白，PreS1含有肝细胞膜受体，在HBV感染肝细胞和机体免疫应答反应中起重要作用。本研究旨在应用酶联免疫吸附试验，基因检测以及病理肝活检等方法，联合动态对比分析乙型肝炎病毒PreSl在诊断乙型肝炎患者预后以及病毒复制中的作用。
1 材料与方法
1.1 标本来源：所有标本均来自于2010年5月一2012年11月来我院肝病门诊就诊的患者及住院患者。慢性乙型肝炎患者1622例，其中男1306例，女317例，健康对照100名，来自我院非乙型肝炎住院患者。急性发病的慢性乙型肝炎男性患者血清31例（28例HBV DNA阳性）。ereS1和HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎男性患者血清49例。急性乙型肝炎患者血清39例，所有标本一20℃保存待检。
1.2 试剂和方法：乙型肝炎病毒ereS1采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心方法检测，试剂购于北京万泰生物技术有限公司。乙型肝炎病毒DNA采用PE5700核酸扩增荧光定量检测仪（以>10 Copies/ml为阳性）和TECHNE核酸检测仪测定，试剂购自达安基因股份有限公司和华美生物公司。乙型肝炎血清标志物（HBV—M）检测试剂盒购自华美生物公司。质控品来自辽宁省临床检验中心。
1.3 统计学处理：采用方差分析组间差异统计。
2 结果
2.1 ereS1与HBV DNA、HBV—M间的关系：1622例慢性乙型肝炎患者，其中513例乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性组中ereS1 441例（86.0%），HBVDNA 457例（89.1%），这组患者存在病毒高复制，三者间差异无显著意义。548例乙型肝炎病毒e抗体HBeAb组中PreS1 203例（37.0%），HBV DNA 192例（35.0%）部分患者仍有病毒复制，二者间差异无显著意义。437例HBsAg、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）阳性组中ereS1 131例（30.0%），HBV DNA 135例（30.9%）。单独HBcAb 组也检出一定数量的ereS1和HBV DNA。表明部分HBeAg阴性而HBe抗体阳性（或者阴性）患者仍存在着病毒的复制，PreS1与HBV DNA两者间检出率差异无显著性。136例HBV—M阴性血清未检测出PreS1和HBV DNA，表明试验的特异性是好的。
2.2 不同病程的慢性乙型肝炎患者血清，PreS1与HBeAg和HBV DNA的符合率：29例急性发病1—5周的慢性乙型肝炎患者血清PreS1 24例（82.8%），HBeAg 24例（82.8%），HBV DNA 26例（89.7%），三者间检出率高度符合。21例6—10周血清和14例11—30周血清PreS1，HBeAg和HBV-DNA检出结果同样高度符合，差异无显著意义。29例患者血清平行检测过程中，11—30周时，只追踪到14例。
3 讨论
HBV编码病毒外膜蛋白s基因区又分为s区、前s1区、前s2区，分别编码s蛋白，PreS1和前s2蛋白。乙型肝炎病毒PreS1参与介导病毒颗粒黏附宿主肝细胞并直接反应HBeAg，HBV DNA的血清浓度[1]。Petit等[2] 的研究认为PreS1与HBV的复制指标HBV DNA和HBeAg有较好的一致性。在本实验中HBeAg阳性组中PreS1和HBVDNA阳性率分别为86.0% 和89.1%，三者间有很好的一致性。
本实验在乙型肝炎患者不同血清标志物中，如HBsAg ，抗HBc组，抗HBc组，PreS1和HBV DNA也有很好的一致性，表明检测PreS1在反映HBV复制及传染性方面比HBeAg更有意义。在29例急性乙型肝炎患者中，不同病程的患者血清PreS1与HBV DNA符合率差异较大，在1～5周，6～10周，11～30周三個时间段，PreS1阳性率分别为82.8%，31%和14% ，HBV DNA阳性率分别为89.7%，71%和23%。提示在急性乙型肝炎患者中PreS1和HBVDNA免疫应答的时间不同，PreS1可引起机体的免疫应答并可调节机体对PreS1的免疫反应，从而促进病毒清除和疾病的好转。
前s1抗原的体液免疫应答常在急性HBV的早期出现[3]，PreS1阴转越早，AHB的病程越短，本研究，29例急性乙型肝炎患者三组不同时段，PreS1与ALT比较没有统计学差异，P>0.05，提示PreS1与ALT的一致性。而HBV DNA与ALT比较有统计学差异P<0.01，表明PreS1在AHB病程中先于HBVDNA阴转，较早预示病情的好转，而在急性乙型肝炎患者ALT正常后，疾病处在恢复期中，用PCR法检测血清或单个核细胞。我们也检测到微量HBV DNA，恢复期中极低水平的病毒血症似无重要的临床和流行病学意义。
这从三组不同时段HBV DNA阳性率高于PreS1阳性率中也可得到证实。提示急性乙型肝炎患者测定PreS1对临床诊断、治疗和预后有指导意义。乙型肝炎病毒PreS1检测，在诊断乙型肝炎患者预后，以及病毒在机体内复制的重要作用，应引起重视。
参考文献：
[l] Hu PS.Carlthers fuL Jr.Fiorenza V.et a1.Quantitative studies of the hepatitis B viral pre—S ：proteins：lack of correlation with the HBeAg status.J Virol Methods.1987，16：97-114.
[2] Petit MA，Zoulim F，Capel F，et a1.Variable expression of preS1 antigen in serum during chronic hepatitis B virus infection ：anaccurate marker for the level of hepatitis B virus replication.Hepatology，1990，l1：809-814.
[3] 冯福民，米志宝，张习坦等，以Pres1合成肽为抗原检测PreS1抗体 中华医学检验杂志，1995，18：154—157.
前Sl蛋白（preS1），前s2蛋白和乙型肝炎病毒s抗原（HBsAg）三者共同构成乙型肝炎病毒（HBV的衣壳蛋白，PreS1含有肝细胞膜受体，在HBV感染肝细胞和机体免疫应答反应中起重要作用。本研究旨在应用酶联免疫吸附试验，基因检测以及病理肝活检等方法，联合动态对比分析乙型肝炎病毒PreSl在诊断乙型肝炎患者预后以及病毒复制中的作用。
1 材料与方法
1.1 标本来源：所有标本均来自于2010年5月一2012年11月来我院肝病门诊就诊的患者及住院患者。慢性乙型肝炎患者1622例，其中男1306例，女317例，健康对照100名，来自我院非乙型肝炎住院患者。急性发病的慢性乙型肝炎男性患者血清31例（28例HBV DNA阳性）。ereS1和HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎男性患者血清49例。急性乙型肝炎患者血清39例，所有标本一20℃保存待检。
1.2 试剂和方法：乙型肝炎病毒ereS1采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心方法检测，试剂购于北京万泰生物技术有限公司。乙型肝炎病毒DNA采用PE5700核酸扩增荧光定量检测仪（以>10 Copies/ml为阳性）和TECHNE核酸检测仪测定，试剂购自达安基因股份有限公司和华美生物公司。乙型肝炎血清标志物（HBV—M）检测试剂盒购自华美生物公司。质控品来自辽宁省临床检验中心。
1.3 统计学处理：采用方差分析组间差异统计。
2 结果
2.1 ereS1与HBV DNA、HBV—M间的关系：1622例慢性乙型肝炎患者，其中513例乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性组中ereS1 441例（86.0%），HBVDNA 457例（89.1%），这组患者存在病毒高复制，三者间差异无显著意义。548例乙型肝炎病毒e抗体HBeAb组中PreS1 203例（37.0%），HBV DNA 192例（35.0%）部分患者仍有病毒复制，二者间差异无显著意义。437例HBsAg、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）阳性组中ereS1 131例（30.0%），HBV DNA 135例（30.9%）。单独HBcAb 组也检出一定数量的ereS1和HBV DNA。表明部分HBeAg阴性而HBe抗体阳性（或者阴性）患者仍存在着病毒的复制，PreS1与HBV DNA两者间检出率差异无显著性。136例HBV—M阴性血清未检测出PreS1和HBV DNA，表明试验的特异性是好的。
2.2 不同病程的慢性乙型肝炎患者血清，PreS1与HBeAg和HBV DNA的符合率：29例急性发病1—5周的慢性乙型肝炎患者血清PreS1 24例（82.8%），HBeAg 24例（82.8%），HBV DNA 26例（89.7%），三者间检出率高度符合。21例6—10周血清和14例11—30周血清PreS1，HBeAg和HBV-DNA检出结果同样高度符合，差异无显著意义。29例患者血清平行检测过程中，11—30周时，只追踪到14例。
3 讨论
HBV编码病毒外膜蛋白s基因区又分为s区、前s1区、前s2区，分别编码s蛋白，PreS1和前s2蛋白。乙型肝炎病毒PreS1参与介导病毒颗粒黏附宿主肝细胞并直接反应HBeAg，HBV DNA的血清浓度[1]。Petit等[2] 的研究认为PreS1与HBV的复制指标HBV DNA和HBeAg有较好的一致性。在本实验中HBeAg阳性组中PreS1和HBVDNA阳性率分别为86.0% 和89.1%，三者间有很好的一致性。
本实验在乙型肝炎患者不同血清标志物中，如HBsAg ，抗HBc组，抗HBc组，PreS1和HBV DNA也有很好的一致性，表明检测PreS1在反映HBV复制及传染性方面比HBeAg更有意义。在29例急性乙型肝炎患者中，不同病程的患者血清PreS1与HBV DNA符合率差异较大，在1～5周，6～10周，11～30周三個时间段，PreS1阳性率分别为82.8%，31%和14% ，HBV DNA阳性率分别为89.7%，71%和23%。提示在急性乙型肝炎患者中PreS1和HBVDNA免疫应答的时间不同，PreS1可引起机体的免疫应答并可调节机体对PreS1的免疫反应，从而促进病毒清除和疾病的好转。
前s1抗原的体液免疫应答常在急性HBV的早期出现[3]，PreS1阴转越早，AHB的病程越短，本研究，29例急性乙型肝炎患者三组不同时段，PreS1与ALT比较没有统计学差异，P>0.05，提示PreS1与ALT的一致性。而HBV DNA与ALT比较有统计学差异P<0.01，表明PreS1在AHB病程中先于HBVDNA阴转，较早预示病情的好转，而在急性乙型肝炎患者ALT正常后，疾病处在恢复期中，用PCR法检测血清或单个核细胞。我们也检测到微量HBV DNA，恢复期中极低水平的病毒血症似无重要的临床和流行病学意义。
这从三组不同时段HBV DNA阳性率高于PreS1阳性率中也可得到证实。提示急性乙型肝炎患者测定PreS1对临床诊断、治疗和预后有指导意义。乙型肝炎病毒PreS1检测，在诊断乙型肝炎患者预后，以及病毒在机体内复制的重要作用，应引起重视。
参考文献：
[l] Hu PS.Carlthers fuL Jr.Fiorenza V.et a1.Quantitative studies of the hepatitis B viral pre—S ：proteins：lack of correlation with the HBeAg status.J Virol Methods.1987，16：97-114.
[2] Petit MA，Zoulim F，Capel F，et a1.Variable expression of preS1 antigen in serum during chronic hepatitis B virus infection ：anaccurate marker for the level of hepatitis B virus replication.Hepatology，1990，l1：809-814.
[3] 冯福民，米志宝，张习坦等，以Pres1合成肽为抗原检测PreS1抗体 中华医学检验杂志，1995，18：154—157.