突变型干扰素-τ的表达、纯化及其抗乙型肝炎病毒作用

• 作 者: 张晴妮 徐骥 芮康宁 罗鹏 杨子义
• 机 构: 上海富纯中南生物技术有限公司
• 出 处: 中国生物制品学杂志
• 发表日期: 2008年11期
• 关键词: 干扰素-τ 突变型 毕赤酵母 抗病毒作用 乙型肝炎病毒 Interferon-τ Mutant Pichia pastoris Antiviral ef
• 基金项目: 浦东新区科技专项基金项目（PKJ2004-76）.

目的在毕赤酵母中表达突变型干扰素-τ（IFN-τ），并检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用。方法将绵羊IFN-τ序列中6个氨基酸突变为人IFN-α相应的氨基酸，将合成的基因克隆至pPICZα质粒，构建突变型IFN-τ表达质粒DPICZα-IFN-τ转化巴斯德毕赤酵母中进行高密度发酵。发酵上清液经超滤浓缩、离子交换层析和分子筛层析纯化后，检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用，并与市售IFN-α2a进行比较。结果发酵上清液中突变型IFN-τ的表达量为400～500mg／L，占上清总蛋白的40％以上；纯化收率达