重组真核质粒pCMV4—rZP3′构建及在小鼠体内的表达

• 作 者: 周飞 杨颖 彭景楩
• 机 构: 中国科学院动物研究所生殖生物学国家重点实验室
• 出 处: 动物学杂志
• 发表日期: 2001年3期
• 关键词: DNA疫苗 卵透明带 ZPC RT-PCR 重组真核质粒 抗生育 DNA vaccine Zona pellucida ZPC RT|PCR

选取兔透明带ZPC基因序列的部分片段（编码263-415位的氨基酸，rZP3′）作为靶抗原，构建兔ZP3′基因疫苗，研究其阻断受精的效果。提取成熟雌兔卵巢的总RNA，RT-PCR克隆兔透明带ZPC的cDNA，直接插入到克隆质粒PCR○ R 2.1中，构建克隆质粒PCR○ R 2.1-rZPC′，再将靶片段用Hind Ⅲ、X-bal双酶切从克隆质粒PCR○ R 2.1-rZPC′切下，1%的低熔点琼脂糖电泳回收，亚克隆到真核表达质粒pCMV4中，构建真核表达质粒pCMV4-rZPC′。将质粒直接注射到活体小