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探究shRNA Twist基因对肺腺癌NCI-H1299细胞增殖和侵袭影响的机制。
方法构建Twist的siRNA干扰表达载体，将NCI-H1299细胞分成3组，即空白对照组，阴性对照组和实验组。空白对照组为未做任何处理的细胞组，阴性对照组是经空白载体的慢病毒转染的细胞组，实验组是由shRNA Twist的慢病毒干扰载体构建的慢病毒转染细胞组。qRT-PCR和Western blot等方法检测Twist的表达；Transwell试剂盒检测细胞侵袭；CCK-8试剂盒检测细胞增殖。
结果⑴慢病毒滴度的检测结果：shRNA-Twist载体慢病毒转染滴度为3×108 TU/ml；⑵qRT-PCR检测结果显示，实验组和阴性对照组相比，Twist的mRNA的相对表达量明显降低，差异有统计学意义(q＝3.177，P＝0.0234)。⑶Western blot检测结果显示，实验组和阴性对照组相比，Twist蛋白相对表达量明显降低，差异有统计学意义(q＝4.071，P＝0.0304)。⑷Transwell实验结果显示，三组之间细胞迁移比较差异具有统计学意义(F＝19.472，P＝0.000)。其中实验组和阴性对照组相比，迁移数量明显降低，差异有统计学意义(q＝3.567，P＝0.0318)。⑸CCK-8检测结果显示，三组增殖率比较差异有统计学意义(F＝20.983，P＝0.000)。实验组与阴性对照组比较增殖率明显降低，差异有统计学意义(q＝5.272，P＝0.0157)。
结论shRNA Twist基因可以明显抑制肺腺癌NCI-H1299细胞的增殖和侵袭。